小鼠原代胰腺上皮细胞在培养体系中，需要特别关注细胞外基质的选择。Matrigel或胶原蛋白涂层能为上皮细胞提供近似体内的基底膜环境，有助于维持细胞极性和三维结构。培养基中需添加表皮生长因子（EGF）、胰岛素样生长因子（IGF-1）等关键因子，这些成分不仅能促进细胞贴壁增殖，还能维持其特有的转运和分泌功能。值得注意的是，原代细胞对培养条件极为敏感，需将二氧化碳浓度严格控制在5%，湿度保持在95%以上，以模拟胰腺组织的微环境。
为验证细胞纯度，可进行细胞角蛋白19（CK19）和淀粉酶的双重免疫荧光染色——前者标记导管上皮细胞，后者特异性识别腺泡细胞。功能性实验中，碳酸酐酶分泌检测和囊性纤维化跨膜传导调节因子（CFTR）活性测定是评估导管细胞功能的金标准，而淀粉酶分泌实验则能有效反映腺泡细胞的生理状态。
这种培养体系在疾病建模方面展现出独特优势。通过添加炎症因子如TNF-α或IL-6，可构建急性胰腺炎模型；而采用慢性高糖刺激则能模拟糖尿病相关的胰腺病变。最新研究还尝试将类器官培养技术与微流控芯片结合，构建具有血管网络的胰腺上皮模型，为研究细胞间相互作用提供更接近体内的实验平台。
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