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              上海帛科生物技术有限公司
                 
                 
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              Tuner(DE3)pLysS 感受态细胞
              起订量 (瓶)价格
              1-102350 /瓶
              ≥101250 /瓶
              • 品牌:帛科
              • 产地:进口、国产
              • 货号:BK-G63287
              • 发布日期: 2021-02-21
              • 更新日期: 2025-06-06
              产品详请
              产地 进口、国产
              保存条件 低温冷藏
              品牌 帛科
              货号 BK-G63287
              用途 产品仅用于科研
              组织来源 详见说明书
              细胞形态 详见说明书
              是否是肿瘤细胞
              CAS编号
              保质期 详见说明书
              器官来源 详见说明书
              免疫类型 详见说明书
              品系 详见说明书
              生长状态 详见说明书
              物种来源 详见说明书
              包装规格 100ul*10 100ul*50
              纯度 %
              是否进口

              细胞培养操作规程:

              一.培养基及培养冻存条件准备:
              1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
              2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
              3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
              二.细胞处理:
              1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
              2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
              对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
              方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

              规格参数:

              产品名称:Tuner(DE3)pLysS 感受态细胞
              规格 :100ul*10 100ul*50
              分类:表达感受态细胞
              用途:生化试剂(用于科研试验研究)
              储存条件: -70℃保存,必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月。
              外观:(性状) 干冰运输,单加10kg干冰费
              单位: 袋

              注意事项:


              1. 感受态细胞*在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
              2. 混入质?;蛄硬锸庇η崛岵僮?。
              3. 转化高浓度的质?;蚋咝实牧硬锟上嘤跎僮钪沼糜谕堪宓木?。
              同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
              答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
              感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
              答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

              长春西?。ū曜计罚┲柿抗娓瘢汉坎舛?/span>Vinpocetine  英文名称RatCD23ELISAKit大鼠CD23规格:96T/48T  大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒 ,英文名: TAP ELISA Kit

              枸橼酸铋雷尼替?。ū曜计罚┲柿抗娓瘢汗┘觳橛?/span>Ranitidine bismuth   可溶性植物叶绿体总蛋白制备试剂盒20  人抗肾上腺皮质抗体(AAA)ELISA检测试剂盒HumanAi-adrenocoicalaibody,AAAELISAKit 96T/48T

              丹曲林钠(标准品)质量规格:含量测定Dantrolene  hemiheptahydrate  ELISAKitSMM人平滑肌肌球蛋白规格:48T/96T  大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)试剂盒 Rat α2 macroglobulin,α2 MG ELISA Kit

              呱西替柳(标准品)质量规格:含量测定Guacetisal  小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA试剂盒 ,英文名: α1-AGP ELISA Kit  CLIAKitforST1(HumanSomelysin-1)ELISAKit人基质裂解素规格:48T/96T

              RabbitVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit兔内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒规格:96T/48T  28649-60-7环氧续随子醇品牌  Epoxylathyrol  

              载玻片细胞IGF蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20  6873-13-8黄柏碱规格  Phellodendrine

              Humanβ-siteAPP-CleavingEnzyme1,1BACE1ELISA试剂盒人β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)ELISA试剂盒规格:96T/48T  751-03-1黄柏酮  Obacunone

              小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒 ,英文名: TGF-β1 ELISA Kit  40246-10-4黄豆黄苷说明书  Glycitin

              小鼠糖原1酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA检测试剂盒MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit 96T/48T  40957-83-3黄豆黄素品牌  Glycitein

              57-87-4甾醇  Ergosterol   猪样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)试剂盒 Porcine IGFBP-3 ELISA Kit

              578-74-5芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷品牌  Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside   猪样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA检测试剂盒Porcineinsulin-likegrowthfactorsbindingprotein3,IGFBP-3ELISAKit 96T/48T

              57817-89-7甜菊苷  Stevioside  猪样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)试剂盒 Pig insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit

              574-84-5秦皮素  Fraxetin  猪样生长因子2(IGF-2)试剂盒 Porcine insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA Kit

              57420-46-9胡麻属苷品牌  Sesamoside   猪样生长因子2(IGF-2)ELISA检测试剂盒Porcineinsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit 96T/48T

              Tuner(DE3)pLysS 感受态细胞操作方法:

              1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质?;蛄硬铮┎⒂檬植Υ駿P管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
              2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
              3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
              4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

              5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。

              联系方式
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