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              上海帛科生物技术有限公司
                 
                 
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              M15(pREP4) 感受态细胞
              起订量 (瓶)价格
              1-102350 /瓶
              ≥101250 /瓶
              • 品牌:帛科
              • 产地:进口、国产
              • 货号:BK-G63291
              • 发布日期: 2021-02-21
              • 更新日期: 2025-07-11
              产品详请
              产地 进口、国产
              保存条件 低温冷藏
              品牌 帛科
              货号 BK-G63291
              用途 产品仅用于科研
              组织来源 详见说明书
              细胞形态 详见说明书
              是否是肿瘤细胞
              CAS编号
              保质期 详见说明书
              器官来源 详见说明书
              免疫类型 详见说明书
              品系 详见说明书
              生长状态 详见说明书
              物种来源 详见说明书
              包装规格 100ul*10 100ul*50
              纯度 %
              是否进口

              细胞培养操作规程:

              一.培养基及培养冻存条件准备:
              1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
              2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
              3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
              二.细胞处理:
              1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
              2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
              对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
              方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

              规格参数:

              产品名称:M15(pREP4) 感受态细胞
              规格 :100ul*10 100ul*50
              分类:表达感受态细胞
              用途:生化试剂(用于科研试验研究)
              储存条件: -70℃保存,必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月。
              外观:(性状) 干冰运输,单加10kg干冰费
              单位: 袋

              注意事项:


              1. 感受态细胞*在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
              2. 混入质?;蛄硬锸庇η崛岵僮?。
              3. 转化高浓度的质?;蚋咝实牧硬锟上嘤跎僮钪沼糜谕堪宓木?。
              同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
              答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
              感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
              答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

              粘酸(>98%,BC)Mucic acid质量规格:>98%,BC  小鼠型前胶原肽(PⅢNP)ELISA检测试剂盒MouseN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 96T/48T  ELISAKitOH小鼠25羟基维生素D3规格:48T/96T

              碲标准溶液(100μg/ml,基体:HCI)Tellurium standard质量规格:100μg/ml,基体:HCI  人衣原体抗体(Cpn-Ab)试剂盒 Human Chlamydia pneumoniae aibody,Cpn-Ab ELISA Kit  ChickenIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKitβ干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒规格:96T/48T

              铥标准溶液(1000μg/mL,基体:10%HCL)Thulium standard质量规格:1000μg/mL,基体:10%HCL  RatLeptin,LEPELISAKit大鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒规格:96T/48T  人基质金属蛋白酶10(MMP-10)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

              钒标准溶液(500mg/L,溶剂:水)Vanadium standard质量规格:500mg/L,溶剂:水  COLLAGENII蛋白共沉淀分析试剂盒5  小鼠胆酯转移蛋白(CETP)试剂盒 Mouse cholest erolester ansfer protein,CETP ELISA Kit

              Humanβ-Thromboglobulin,β-TGELISA试剂盒人β血小板球蛋白环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒规格:96T/48T  136849-88-2灰毡毛忍冬皂苷乙品牌  Macranthoidin B

              小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒 ,英文名: TGF-α ELISA Kit  16830-15-2积雪草苷规格  Asiaticoside

              小鼠糖原1酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA检测试剂盒MouseGlycogenphosphorylaseII,GP-IIELISAKit 96T/48T  464-92-6积雪草酸  Asiatic acid

              人抗SSB/La抗体试剂盒 Human ai-SSB/La aibody ELISA Kit  6902-91-6吉马酮说明书  Germacrone

              Rabbitβ-Thromboglobulin,β-TGELISAKit兔子β血小板球蛋白环蛋白(β-TG)ELISA试剂盒规格:96T/48T  357-70-0加兰他敏品牌  Galanthamine

              557-61-9二十八烷醇说明书  Octacosanol   猪血浆激肽释放酶(KLKB1)试剂盒 Pig plasma kallikrein,KLKB1 ELISA Kit

              55750-84-0西红花苷II说明书  Crocin II  猪血红蛋白(Hb)试剂盒 Pig hemoglobin,Hb ELISA Kit

              55576-66-4仙鹤草酚B规格  Agrimol B  猪性因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)试剂盒 Pig von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit

              555-66-86-姜烯酚  6-Shogaol   猪舒缓激肽(BK)试剂盒 Pig Bradykinin,BK ELISA Kit

              55481-88-4大叶茜草素规格  Rubimaillin   猪生成素受体Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA检测试剂盒Porcineangiopoietieceptoie2,ANG-R-Tie2ELISAkit 96T/48T

              M15(pREP4) 感受态细胞操作方法:

              1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质?;蛄硬铮┎⒂檬植Υ駿P管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
              2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
              3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
              4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

              5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。

              联系方式
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