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              上海帛科生物技术有限公司
                 
                 
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              F-TOP10 感受态细胞
              起订量 (瓶)价格
              1-102350 /瓶
              ≥101250 /瓶
              • 品牌:帛科
              • 产地:进口、国产
              • 货号:BK-G63251
              • 发布日期: 2021-02-21
              • 更新日期: 2025-07-11
              产品详请
              产地 进口、国产
              保存条件 低温冷藏
              品牌 帛科
              货号 BK-G63251
              用途 产品仅用于科研
              组织来源 详见说明书
              细胞形态 详见说明书
              是否是肿瘤细胞
              CAS编号
              保质期 详见说明书
              器官来源 详见说明书
              免疫类型 详见说明书
              品系 详见说明书
              生长状态 详见说明书
              物种来源 详见说明书
              包装规格 100ul*20 100ul*100
              纯度 %
              是否进口

              细胞培养操作规程:

              一.培养基及培养冻存条件准备:
              1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
              2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
              3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
              二.细胞处理:
              1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
              2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
              对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
              方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

              规格参数:

              产品名称:F-TOP10 感受态细胞
              规格 :100ul*20 100ul*100
              分类:克隆感受态细胞
              用途:生化试剂(用于科研试验研究)
              储存条件: -70℃保存,必须加干冰运输。自收货之日起液氮保存至少一年,-70℃保存至少6个月。
              外观:(性状) 干冰运输,单加10kg干冰费
              单位: 袋

              注意事项:


              1. 感受态细胞*在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
              2. 混入质?;蛄硬锸庇η崛岵僮?。
              3. 转化高浓度的质?;蚋咝实牧硬锟上嘤跎僮钪沼糜谕堪宓木?。
              同一批感受态细胞,用含目的片段的T载体质粒转化(阳性对照)能长出密密麻麻的菌落,而用另一种载体和目的片段的连接产物转化,却一个菌都没长出来,重复了三次都这样。请问这是感受态细胞的制作不过关,还是连接出了问题?哪个可能性大些?
              答:应该是连接的问题。所有连接反应建议同时转化酶切后的质粒作为另一个阴性对照,确定酶切是否完全。同时连接前请确定质粒和片段浓度达到最小连接量的要求。
              感受态细胞放到-80冰箱了有半年了,还能用来转化质粒吗?
              答:如-80冰箱储存过程中没有发生冻融的情况,是可以用来转化的,但是由于冻存时间过长,转化效率会有所下降,如果用于普通的质粒重转或TA克隆等高效连接体系也是可以的,如珍贵的样品请选用较为新鲜的感受态细胞。

              周效磺胺(磺胺多辛)sulphadoxine质量规格:>99%,BR  化微粒体1脂酶D1(PhospholipaseD1)活性荧光定量检测试剂盒20  Humansolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISAkit 人白介素2可溶性受体α(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

              周效磺胺(标准品)sulphadoxine质量规格:HPLC>98%,标准品  RatImmunoglobulinM,IgMELISA试剂盒大鼠球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T  Humanneuophilicalkalinephosphatase,NAPELISA试剂盒人中性粒细胞碱性1酸酶(NAP)ELISA试剂盒规格:96T/48T

              盐酸罗匹尼罗Ropinirole HCl质量规格:>98.0%  小鼠粘蛋白4(MUC4)ELISA试剂盒 ,英文名: MUC4 ELISA Kit  ELISAKitTNF-α猪坏死因子α规格:48T/96T

              盐酸罗哌卡因Ropivacaine  质量规格:>99%,BR,一水合物  层连蛋白/板层素(LN)ELISA检测试剂盒MonkeyLaminin,LNELISAKit 96T/48T  Humanfetalsulfoslycoproteinaigen,FSAELISAKit人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)ELISA试剂盒规格:96T/48T

              英文名称Mouse17-KSELISAKIT小鼠17-同皮质类(17-KS)规格:96T/48T  760961-03-3常春藤苷D品牌  Hederacoside D

              产气荚膜梭菌肠(Closidiumperfringenscpe)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20  36284-77-2常春藤皂苷B规格  Hederasaponin B

              RatFreeTestoterone,F-TESTOELISA试剂盒大鼠游离睾同(F-TESTO)ELISA试剂盒规格:96T/48T  465-99-6常春藤皂苷元  Hederagenin

              小鼠组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒 ,英文名: histon-H2b ELISA Kit  140147-77-9朝藿定A1说明书  Epimedin A1

              小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA检测试剂盒MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit 96T/48T  110623-72-8朝藿定A品牌  Epimedin A

              80321-69-3七叶胆苷XVII规格  Gypenoside XVII  组织AX1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

              80286-58-4青蒿酸规格  Artemisic acid  组织AURORA-C激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

              80154-34-3豆腐果苷  Helicid   组织AURORA-B激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

              7-乙氧基莫诺苷规格  7-O-ethyl-morroniside   组织AURORA-A激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20

              79916-77-1连翘脂苷A说明书  Forsythoside A  组织ATP生物发光法定量检测试剂盒50

              F-TOP10 感受态细胞操作方法:

              1. DH5α感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质?;蛄硬铮┎⒂檬植Υ駿P管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
              2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
              3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
              4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

              5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15小时。

              联系方式
              手机:13564080845
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