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产地 | 国产 |
保存条件 | 详见说明书 |
品牌 | 帛科 |
货号 | 0001 |
用途 | 仅供科研研究实验 |
组织来源 | |
细胞形态 | |
是否是肿瘤细胞 | 否 |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 人源 |
免疫类型 | 详见说明书 |
品系 | 原代细胞 |
生长状态 | 贴壁 |
物种来源 | 人源 |
包装规格 | T-25*1瓶 |
是否进口 | 否 |
注意事项:
该细胞只可用于科研。出现以下情况不予以重发:客户造成细胞污染;客户不正确操作致细胞状态不好;细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片;细胞培养时经其它处理;细胞收到2天内,未告知相关情况。
基本信息:
产品名称 | 人原代细胞 | 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 |
种属 | 人源 | 传代次数 |
|
运输 | 常温 | 货号 | 0001 |
人原代细胞是指直接从人体组织或器官中分离、培养的细胞,未经永生化处理或基因改造,保留了原始细胞的生物学特性。其来源广泛,如皮肤、血液、肝脏、脑组织等组织器官都可作为获取原代细胞的来源。
特点
- 来源直接:直接取自人体组织,需遵守伦理规范,如获得供体的知情同意等。
- 有限增殖能力:在体外分裂次数有限,通常仅传代几次后就会进入衰老或死亡,无法像细胞系那样长期传代。
- 异质性:同一批原代细胞可能包含不同亚型的细胞,如肝细胞中可能混有库普弗细胞等,需要通过纯化技术提高纯度。
- 生理相关性高:保留了供体的遗传背景、表观特征及代谢功能,实验结果更具临床参考价值。
培养方法
- 组织块培养法:将组织切成小块,接种于培养皿中,加入培养基,让细胞从组织块中迁移出来并贴壁生长。
- 消化培养法:利用胰蛋白酶、胶原酶等消化酶将组织消化成单个细胞,然后进行培养。
- 悬浮细胞培养法:对于血液等来源的悬浮细胞,直接将细胞接种于合适的培养基中进行培养。
常见类型及应用
- 外周血单个核细胞:来源于外周血,主要用于免疫反应、病毒感染等方面的研究。
- 肝细胞:从肝脏组织分离得到,常用于药物代谢、肝毒性测试等领域。
- 神经元:可从脑组织或诱导多能干细胞中获得,用于神经退行性疾病研究等。
公司出售的产品: 小鼠乳腺上皮细胞 人原代骨微内皮细胞专用培养基 小鼠海马神经元细胞 角质细胞无血清培养基(D-KSFM ) 小鼠脊髓神经元细胞 NeuroGro 神经元培养基 小鼠雪旺细胞 CO? 独立培养基 小鼠星形胶质细胞 F12 培养基 小鼠小胶质细胞 MEM(无酚红 ) 培养基 小鼠少突胶质细胞 人原代细胞McCoy’s 5A 培养基 小鼠神经胶质细胞 AIM-V 细胞培养基 小鼠脑动脉平滑肌细胞 MEM 培养基
细胞操作步骤:
传代步骤:
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1 - 2次。
加2ml消化液(0.25% Trypsin - 0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1 - 2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
按6 - 8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1 - 2mL培养液后吹匀。
将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
复苏步骤:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1 - 2mL培养基后吹匀?;灰翰⒓觳橄赴芏?。
冻存步骤:
以T25瓶为例:
细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1 - 2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
1000RPM离心5分钟去掉上清,用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。
将冻存管置于程序降温盒中,放入 - 80℃冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存,记录冻存管位置以便下次拿取。