免疫荧光技术实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

英文名称   Anti-ZNRF4
中文名称  锌指/环指蛋白4抗体
浓    度  1mg/1ml 
规 格  0.2ml/200μg
抗体来源  Rabbit
克隆类型  polyclonal 
交叉反应   Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep 
产品类型     一抗
别    名  RING finger protein 204; RNF204; spzn; Ssrzf1; zinc and ring finger 4; Zinc/RING finger protein 4 precursor; ZNRF4_HUMAN.
研究领域   细胞生物 免疫学 信号转导 干细胞 锌指蛋白 表观遗传学
蛋白分子量   predicted molecular weight: 44kDa
性    状  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ZNRF4
亚    型  IgG 
纯化方法  affinity purified by Protein A 
储 存 液   Preservative: 15mM , Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200

抗体制备：

1.材料与试剂
  a．提取的动物 Ig
  b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
  c．青霉素和链霉素
  d．实验动物 兔
  e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

抗原准备：
经常使用的抗原有：偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的，通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别：
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原（大分子抗原、半抗原偶联物）刺激机体产生免疫反应，有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定：采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释，加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。 

实验原理：

（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。 
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 
（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用?？固蹇杀恢行匝卫喑恋?。在 上?？捎昧蛩犸Щ蛄蛩崮拼用庖哐逯谐恋沓龊锌固宓那虻鞍?，再经透析法将其纯化。
EPHB2 Others Human 人 EphB2 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-基异shēng huà shì jì容量：25克

人前脂肪细胞-皮下cDNAHPA-s cDNA酚试剂 3-Methyl-2-benzothialinone (HPLC,≥99.... 38894-11-0 5G 通用试剂

小鼠心肌细胞(MCM)(1×106)鳞醋胍 Gucnidinq phosphctq 243-3-4

正常大鼠肾细胞;NRK-52EHotstartTaqDNAPolymeraseHotstart Taq DNA聚合酶25毫克高层析，360NADu/mg，液体

杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2F8 小鼠角膜成纤维细胞完全培养基 100mL637-01-4N，N，N’N’-四甲基-1，4-本N,N,N',N'-Tetrametxyl-p-pxenylenediamine dixy7nochloride
HEC-1B细胞，细胞 人细胞,ISK(Ishikawa)细胞 人肺微内皮细胞cDNAHPMEC cDNA叶绿酸铜钠，英文名或英文缩写：Chlorophyllin，级别：BR，98%，规格：200微升/支

长尾绿猴胚胎细胞;4179(S)-(+)-1-氧基-2-炳安 (S)-(+)-1-MqTHOXY-2-PROPYLcMINq 99636-3-2

IgG Others Human 人 IgG1-Fc 人细胞裂解液 (阳性对照) 水合肖醋镥(III) LUTqTIUM nitncTq HYDRcTq 100641-16-2

大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1L-CYSTEINEL-半胱酸*100G52-90-4RT

人脉络丝内皮细胞 (HCPEC)( 5×105 )N,N-二甲基N,N'-Dimetxylpiper
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21岩大戟内酯B（标准品）Jolkinolide B质量规格：HPLC≥98%，标准品

人肝细胞 (HH) (1×106 )路路通内酯（标准品）Liquidambaric lactone质量规格：HPLC≥98%，标准品

CL-0051CaES-17(人细胞)5×106cells/瓶×2甘油三油酸酯（标准品）Glycerine trioleate质量规格：HPLC≥98%，标准品

小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA12 小鼠肺平滑肌细胞完全培养基 100mL长春花碱（标准品）Vinblastine质量规格：HPLC≥98%，标准品

HCT/Taxol 人紫杉醇耐药长春花碱Vinblastine质量规格：HPLC≥98%，BR
锌指/环指蛋白4抗体 人非小细胞细胞;NCI-H23愈创木酚Guaiacol质量规格：AR，液体，仅限本地销售

CD22 Others Mouse 小鼠 Siglec-2 / CD22 人细胞裂解液 (阳性对照) β-硫丹(标准品)β-Endosulfan质量规格：分析标准品

HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞硫丹醇(标准品)Endosulfan alcohol质量规格：分析标准品

M17细胞，神经母细胞瘤细胞 非型细胞,Tsu-Prl细胞 人神经束膜细胞RNAHPC miRNA5 μg圣草苷(标准品)Eriocitrin质量规格：≥98.0%(HPLC),分析标准品

非洲绿猴肾细胞;VERO芴(Standard for GC,≥99%(HPLC))Fluorene质量规格：Standard for GC,≥99%(HPLC)

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