免疫荧光技术实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

英文名称   Anti-ZNF274
中文名称  锌指蛋白274抗体
浓    度  1mg/1ml 
规 格  0.2ml/200μg
抗体来源  Rabbit
克隆类型  polyclonal 
交叉反应   Human, Mouse, Rat, Rabbit 
产品类型     一抗
别    名  SP2114; Zf2; Zinc finger protein 274; Zinc finger protein HFB101; Zinc finger protein with KRAB and SCAN domains 19; Zinc finger protein zfp2; ZKSCAN19; ZN274_HUMAN.
研究领域   细胞生物 信号转导 转录调节因子 锌指蛋白 表观遗传学
蛋白分子量   predicted molecular weight: 74kDa
性    状  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from Human ZNF274
亚    型  IgG 
纯化方法  affinity purified by Protein A 
储 存 液   Preservative: 15mM , Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500

抗体制备：

1.材料与试剂
  a．提取的动物 Ig
  b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
  c．青霉素和链霉素
  d．实验动物 兔
  e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

抗原准备：
经常使用的抗原有：偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的，通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别：
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原（大分子抗原、半抗原偶联物）刺激机体产生免疫反应，有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定：采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释，加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。 

实验原理：

（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。 
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 
（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用?？固蹇杀恢行匝卫喑恋?。在 上?？捎昧蛩犸Щ蛄蛩崮拼用庖哐逯谐恋沓龊锌固宓那虻鞍?，再经透析法将其纯化。
CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人细胞裂解液 (阳性对照) 虎红1公斤

脑动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)2，4-二肖基酚(剧读)(易制暴) 2,4-phqnol 1921/8/2

CA46细胞，人Butts瘤细胞系 小鼠Lewis瘤株,LLT细胞 人肝脏星形细胞裂解物HHSteCL钙黄绿素500克

NCI-H295R(人肾上腺皮质腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2葡萄糖酸盐，英文名或英文缩写： gluconate，级别：BR，土豆来源，规格：10克

CCRF-CEM(人急性细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0094HCC827(人非小细胞细胞)5×106cells/瓶×2 小鼠树突状细胞低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);DG6-GFP硅酮　OV-61Silicone OV-61
大鼠骨骼肌细胞完全培养基 100mLM-肉汤shēng huà shì jì容量：500克

208F大鼠成纤维细胞 208F rat fibroblasts 大鼠成纤维细胞2′-脱氧胞苷-5′-... 2′-Deoxycytidine 5′-triphosphate dis... 102783-51-7 25MG 通用试剂

IFNA8 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 Ierferon alpha-B / IFNA8 蛋白 (His 标签)六二醇 Hqxcqthylqnq glycol 612-12-8

IAR20(大鼠肝细胞) 5×106cells/瓶×2 啤酒酵母液体硫乙醇酸盐培养基(不含琼脂)100克

肝动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)蛋白胨水培养基Peptone Water Medium
CD300C Others Human 人 CD300C / CMRF-35 / IGSF16 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸左西替利嗪Levoceitrizine HCl质量规格：>99%,BR

杂交瘤(B类);Z172A4C4C6F3G12盐酸西替利嗪（标准品）Cetirizine 质量规格：含量测定

KIRREL3 Others Rat 大鼠 KIRREL3 / NEPH2 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸雷莫司琼（标准品）Ramosetron 质量规格：含量测定

肠内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)*度酸（标准品）Etodolac质量规格：含量测定

HCPEpiC细胞，人脉络丛上皮细胞 小鼠瘤细胞,Nb2-11细胞 人前脂肪细胞-皮下cDNAHPA-s cDNA（标准品）Amfebutamone 质量规格：含量测定
锌指蛋白274抗体 AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯（标准品）Benzaldehyde质量规格：含量测定

人骨骼肌成肌细胞总RNAHSkMM NA卡维?。ū曜计罚?/span>Cavidine质量规格：含量测定

HSPA1A Others Human 人 HSP70 / HSPA1A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 5-羟色胺盐酸盐（标准品）Serotonin  质量规格：含量测定

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A月见草油（标准品）Evening primrose oil质量规格：鉴别

NCI-H446[H446]细胞，小细胞细胞 人癌细胞系,ZR-75-30细胞 615小鼠T细胞性瘤株;L7712龙血素A（标准品）Loureirin A 质量规格：含量测定

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