免疫荧光技术实验步骤：
一、准备好试剂与仪器：
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

英文名称   Anti-Wnt11
中文名称  信号通路Wnt11抗体
浓    度  1mg/1ml 
规 格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源  Rabbit
克隆类型  polyclonal 
交叉反应   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit 
产品类型     一抗
别    名  HWNT11; Protein Wnt-11; Wingless-related MMTV integration site 11; Wingless-type MMTV integration site family, member 1; Wingless-type MMTV integration site family, member 11; Wingless-type MMTV integration site family, member 11B; wnt-11; wnt11b.WNT11_HUMAN
研究领域    细胞生物 免疫学 神经生物学 信号转导
蛋白分子量   predicted molecular weight: 36kDa
性    状  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Wnt11
亚    型  IgG 
纯化方法  affinity purified by Protein A 
储 存 液   Preservative: 15mM , Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500

抗体制备：

1.材料与试剂
  a．提取的动物 Ig
  b．弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
  c．青霉素和链霉素
  d．实验动物 兔
  e．其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，杀死实验活体，采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清（无菌采制）

抗原准备：
经常使用的抗原有：偶联多肽、偶联的小分子或化合物、天然或重组蛋白等等。
对可溶性抗原而言，为了增强其免疫原性或改变免疫反应的类型、节约抗原等目的，通常采用加佐剂的方法以刺激机体产生较强的免疫应答。
多克隆抗体和单克隆抗体的区别：
由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。而同一种抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。多克隆抗体是由异源抗原（大分子抗原、半抗原偶联物）刺激机体产生免疫反应，有机体浆细胞分泌的一组免疫球蛋白。
效价测定：采用琼脂扩散法。
⑴ 将血清倍比稀释，加入外周孔。
⑵ 中间孔加动物 Ig。
⑶ 37℃湿盒琼扩24 小时后观察结果。 

实验原理：

（1）特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。 
（2）活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。 
（3）结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。 
（4）可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成自然被动
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通过及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗体分子是一种蛋白质，也具有刺机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗体对理化因子的与一般球蛋白相同：不耐热，60～70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质，均能破坏抗体的作用?？固蹇杀恢行匝卫喑恋?。在 上?？捎昧蛩犸Щ蛄蛩崮拼用庖哐逯谐恋沓龊锌固宓那虻鞍?，再经透析法将其纯化。
大鼠肠平滑肌细胞完全培养基 100mL变色硅胶5KU

HSF人皮肤成纤维细胞 HSF in human skin fibroblasts DMEM+10%FBS或者(进口的新生牛血清NCS)2,4,5-三拂本醋 2,4,5-Trifluorophqnylccqtic ccid 09992-38-0

EGF Protein Human 重组人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白2-()乙磺酸200微升/支保存：-20℃

Y3-Ag 1.2.3(大鼠细胞) 5×106cells/瓶×2 原代内皮细胞特制基础培养基Many types of cells包装：500/250/100mlDNAzol提取试剂100克RT，避光

人颅骨造骨细胞总RNAHCO NA6165-68-02-硼酸2-Thiopxeneporonic acid
EB病毒转化的人B细胞;KM0501PCRDNAMARKERDNA Marker生物技术级透明液体FROZENsigma

SAC-IIB2细胞，腹水瘤细胞 人细胞,Colo320DM细胞 CM-H004人肺大内皮细胞完全培养基100mL3-氧基苄安 3-Mqthoxybqnzylcminq 2071-96-2

大鼠肝细胞瘤;H-4-II-ECALCIUMPHOSPHATE,DIBASIC,DIHYDRATE嶙酸氢钙,二水*白色精细粉末RTsigma

MME Others Mouse 小鼠 MME / CD10 / NEP 人细胞裂解液 (阳性对照) TRYPTOnepROTH,POWDER胰蛋白胨肉汤生物技术级颗粒粉末RT不sigma

间充质干细胞培养基MSCM-acf;1,4-二羟基丁烷9,4-putene7iol;1,4-Dixy7noxybutane;Tetrametxylene glycol
人肠平滑肌细胞(HISMC)( 5×105 ) RA, 大鼠星形胶质细胞 Rattus远华蟾蜍精(标准品)Telocinobufagin质量规格：HPLC≥98%，标准品

猪晶状体上皮细胞PlEpiC日蟾蜍他灵;和蟾毒他灵(标准品)Gamabufotalin质量规格：HPLC≥98%，标准品

EGFR Others Rat 大鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 人细胞裂解液 (阳性对照) 蟾毒它灵(标准品)Bufotaline质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠腮腺细胞完全培养基 100mL黃尿酸Xanthurenic Acid质量规格：>95%,进口

NCI-H23人非小细胞细胞 NCI-H23 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS舒巴坦酸Sulbactam Acid质量规格：>99%,BR
信号通路Wnt11抗体 EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人细胞裂解液 (阳性对照) 单硝酸异山梨酯Isosorbide 5-mononitrate质量规格：含量测定

人晶状体上皮细胞总RNAHLEpiC NA单硝酸异山梨酯Isosorbide 5-mononitrate质量规格：>98%,BR

KLRC1 Others Cynomolgus 食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-单硝酸异山梨酯（标准品）Isosorbide 2-nitrate质量规格：检查用

猫星形脑胶质细胞;PG-4(S+L-)依那普利双酮（标准品）XX质量规格：检查用

PC-3细胞，人细胞 人表皮癌细胞,A-431细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;BALB/C 3T3依那普利拉（标准品）Enalaprilat质量规格：检查用

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