PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：天花病毒PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

BMP-7   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 ADI  Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt  中文名：蒽醌-1,5-二磺酸二钠盐  分子式：C14H6Na2O8S2  度：98.0%

BloodRNAKit   100T                 Periplocogenin  112899-63-5  中文名：  分子式：C28H42O6 

BloodDNAMaxiKit   10T  Periplocogenin  中文名：  分子式：C28H42O6 

BEZ235(NVP-BEZ235)   100mg                 Pilosol A  501086-15-3  中文名：  分子式：C13H12O 

BEZ235 (NVP-BEZ235)   50mg  Pilosol A  501086-15-3  中文名：  分子式：C13H12O  度：%  关键词：
小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Azithromycin dihydrate  117772-70-0  中文名：阿奇霉素二水物  分子式：C38H72N2O12  度：98.0%  关键词： 

小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Ezetimibe  中文名：依泽替米贝  分子式：C24H21F2NO3 

小鼠11β羟基类固醇脱氢酶(11β-HSD)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Azithromycin dihydrate  117772-70-0  中文名：阿奇霉素二水物  分子式：C38H72N2O12 

小鼠1,4,5-三0酸肌醇（IP3）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Azilsartan  中文名：阿齐沙坦  分子式：C25H20N4O5  度：98.0%

小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Azilsartan  中文名：阿齐沙坦  分子式：C25H20N4O5
天花病毒PCR检测试剂盒说明书HL-60人原髓细胞细胞 HL-60 primary human myeloid leukemia cells IMDM(GIBCO)+20%FBS西多福韦质量规格：>98%,BR,可用于细胞培养Cidofovir

IGFBP4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IGFBP4 蛋白 (His 标签)4-氨基-5-咪唑甲酰胺质量规格：>98%(滴定)5-Amino-4-imidazolecarboxamide

GH3(大鼠细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠背脊髓神经元MN-dscTNP 470/O-(氯乙酰氨甲?；?/span>)烟曲霉素醇 质量规格：≥97%AGM-1470

小肠内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)?；鞘ㄋ崮?/span>(进分)质量规格：≥97%进口分装 taurolithocholate

SGK3 Others Human 人 SGK3 / SGKL 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 代森锌质量规格：>90%Zineb
IFNW1 Others Human 人 Ierferon omega-1 / IFNω / IFNW1 人细胞裂解液 (阳性对照) 去氧胆酸盐枸橼酸盐乳糖蔗糖琼脂shēng huà shì jì容量：25克

犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild别嘌醇相关物质A cllopurinol Rqlctqd CoMpound c;3-cMino-4-ccrboxcMidopyrczolq HqMisulfctq 7211-79-1

SEMA5A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 人细胞裂解液 (阳性对照) 半胱安;巯安;2-安;流代醇安;2-安基流醇 CystqcMinq;Dqccrboxycystqinq;2-cMinoqthcnqthiol;2-cMinoqthylMqrccptcn;β-MqrccptoqthylcMinq;ThioqthcnolcMinq;MqrccMinq; Mqc 1960/3/1

人成纤维细胞完全培养基 100mL酸性2，英文名或英文缩写：Nigrosine water soluble，级别：高，99%，规格：10支/盒

C918细胞，人眼脉络色素瘤细胞 粪肠球菌(高耐) 正常小鼠Sertoli细胞;TM43244-41-5四本硼钾potewwium TETRApxenYLBORATE 97
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。