本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
【产品名称】: 克氏锥虫PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Trypanosoma cruziPCR
【货号】: BKP4498
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

克氏锥虫PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板?？芍苯佑昧俅脖瓯救缪?、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

Benzyl L-(+)-mandelate  62173-99-3  中文名：L-(+)-扁桃酸苄酯  分子式：C15H14O3    成纤维生长因子-4   英文名称：   fibroblast growth factor 4   规格：   48T/96T   英文缩写：   FGF-4

N-Benzoyl-leucine  17966-67-5  中文名：N-苯甲?；?/span>-亮氨酸  分子式：3    成纤维生长因子-4   英文名称：   fibroblast growth factor 4   规格：   48T/96T   英文缩写：   FGF-4

N6-Benzoyladenine  4005-49-6  中文名：N6-苯甲?；汆堰?/span>  分子式：C12H9N5O    素   英文名称：   Human Renin   规格：   48T/96T   英文缩写：   RN

Betamipron  3440-28-6  中文名：倍他米隆  分子式：C10H11NO3    视网膜母细胞瘤蛋白1   英文名称：   Human Retinoblastoma Protein 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   RBP1

6-Benzyloxypurine  57500-07-9  中文名：6-苄氧基嘌呤  分子式：C12H10N4O    松弛素-2   英文名称：   Human Relaxin-2   规格：   48T/96T   英文缩写：   RLN-2
细菌乙醇脱氢酶总活性比色法定量检测试剂盒20次  2-Amino-3-Formylchromone  中文名：2-氨基-3-甲?；?/span>  分子式：C10H7NO3  度：98.0%

细菌乙醇脱氢酶总活性(NDMA)比色法定量检测试剂盒20次  2-Amino-4-chlorobenzothiazole  中文名：2-氨基-4-氯苯并噻唑  分子式：C7H5ClN2S  度：98.0%

细菌乙醇比色法定量检测试剂盒20次  2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole  2349-67-9  中文名：2-氨基-5-巯基-1,3,4-噻二唑  分子式：C2H3N3S2  度：98.0%   

细菌样品二维电泳裂解液用于细菌蛋白二维电泳  2-Amino-6-chloropurine  中文名：2-氨基-6-氯嘌呤  分子式：C5H4ClN5  度：98.0%

细菌样品二维电泳裂解液用于细菌蛋白二维电泳  2-Amino-6-chlorobenzothiazole  95-24-9  中文名：2-氨基-6-氯苯并噻唑  分子式：C7H5ClN2S  度：99.0%  关键词：
克氏锥虫PCR检测试剂盒说明书Hs 578T人癌细胞 Hs human breast cancer cell line 578T DMEM+10%FBS琥珀酸；丁二酸质量规格：AR,>99%Succinic acid

ADIPOQ Protein Human 重组人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (Fc 标签)琥珀酸；丁二酸(标准品)质量规格：>99%,标准品Succinic acid

人胚;MRC-5 QBC-939, 人细胞 Humanα-乳香酸（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品alpha-Boswellic acid

小鼠胚胎成骨细胞前体细胞;MC3T3-E1野马追内酯A（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Eupalinolide A

SERPINC1 Others Cynomolgus 食蟹猴 SerpinC1 / AithrombinIII / ATIII 人细胞裂解液 (阳性对照) 红霉素C质量规格：美国进口Erythromycin C
IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人细胞裂解液 (阳性对照) 普通肉汤琼脂培养基25克2～8℃，避光

人低侵袭性脉络膜色素素瘤细胞;OCM-1A腺苷;;;腺速苷;胰苷;腺呤配糖;腺尿环核苷 cdqnosinq 28-61-7

CSF2 Others Human 人 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) 双[三(羟甲基)]基... BIS-TRIS (cell culture tested, ≥98%) 6976-37-0 25G 通用试剂

CoC2(悬浮) BENZALKONIUMCHLORIDE,50%SOLUTION本扎录，50%溶液美国国家处方集级白色至淡黄色粘稠液体RT不sigma

COLO 205人细胞 COLO 205 human colon cancer cells 1640+10% FBSFicoll400 10g/25g Pharmacia分装

PCR检测试剂盒：

克氏锥虫PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。