PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：病毒PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

Alogliptin benzoate  850649-62-6  中文名：阿格列汀苯甲酸盐  分子式：C25H27N5O4    人组织蛋白去乙?；?/span>(HD)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

2-[(6-Chloro-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl)methyl]benzonitrile  865758-96-9  中文名：  分子式：C13H10ClN3O2    人组织蛋白酶抗体(CathAb)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Alogliptin  850649-61-5  中文名：阿格列汀  分子式：C18H21N5O2    人组织蛋白酶S(cath-S)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

(-)-Mandelic acid benzyl ester  97415-09-3  中文名：D-(-)-扁桃酸苄酯  分子式：C15H14O3    人组织蛋白去乙?；?/span>elisa试剂盒   人组织蛋白去乙?；甘约梁?/span>   规格型号：96T/48T   人组织蛋白去乙?；甘约梁?，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（分装），产品别名：人组织蛋白去乙?；甘约梁?、人组织蛋白去乙?；?/span>elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl  147118-37-4  中文名：  分子式：C16H18FN3O3S    人组织蛋白酶抗体elisa试剂盒   人组织蛋白酶抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   人组织蛋白酶抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（分装），产品别名：人组织蛋白酶抗体试剂盒、人组织蛋白酶抗体elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
兔子可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  (Z)-Lachnophyllum lactone  81122-95-4  中文名：  分子式：C10H10O2  度：%  关键词：  植物提取物; 天然产物; 天然产物库

兔子可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  1265908-20-0  中文名：  分子式：C28H40O3 

兔子可溶性E选择素(sE-selectin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione  中文名：  分子式：C10H9BrN4O2 

兔子可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  (tert-Butoxycarbonyl)oxycefcapene pivoxil  中文名：  分子式：C28H37N5O10S2  度：98.0%

兔子可溶性CD40配体elisa试剂盒   兔子可溶性CD40配体试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子可溶性CD40配体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（分装），产品别名：兔子可溶性CD40配体试剂盒、兔子可溶性CD40配体elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     8-Hydroxyhyperforin 8,1-hemiacetal  中文名：  分子式：C35H52O5
病毒PCR检测试剂盒说明书LAYN Others Human 人 Layilin 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸钙(>99%,BR)质量规格：>99%,BRCalcium sulfate, anhydrous

CM-H084人脐平滑肌细胞完全培养基100mL二环己基碳二亚胺(>99%,BR)质量规格：>99%,BRDCC, Dicyclohexylcarbodiimide

SERPINI1 Others Mouse 小鼠 SerpinI1 / Neuroserpin 人细胞裂解液 (阳性对照) 丁二酸二甲酯(>99%,BR)质量规格：>99%,BRDimethyl succinate

小鼠角膜上皮细胞完全培养基 100mL二甲基甲酮钠盐(>97%,BR)质量规格：>97%,BRDimethylglyoxime  salt

L6565小鼠克隆细胞系 L6565 murine leukemia cell line RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS直接蓝71(≥50%,BR)质量规格：≥50%,BRDirect blue 71
软骨细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)N-苯甲酰-2'-脱氧胞苷质量规格：>98%,BRbz-dC

MAP3K8 Others Human 人 TPL2 / MAP3K8 / MEKK8 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N6-苯甲酰-2'-脱氧腺苷质量规格：>98%,BRbz-dA

KM小鼠子瘤株;U145'-O-三苯甲基尿苷质量规格：>97%,BRTrt-rU

NIH/3T3细胞，胚胎成纤维细胞 人高转移细胞,LM3细胞 CL-0104HEp-2(人喉表皮样癌细胞)5×106cells/瓶×2Trt-dU质量规格：>98%,BRTrt-dU

仓鼠肾细胞;BHK-21N2-洛沙坦-洛沙坦(洛沙坦杂质)质量规格：N2-Losartanyl-losartan (Losartan Impurity)
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。