PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：解没食子酸链球菌PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

9-Anthracenecarboxylic acid  中文名：9-蒽甲酸  分子式：C15H10O2    磺酸 SHES   25g

9-Aminominocycline   中文名：  分子式：C23H29ClN4O7    Isicacidsalt   100g              

9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene  中文名：9,9-双[4-(2-羟乙氧基)苯基]芴  分子式：C29H26O4    乙型   英文名称：   Influenza B HA   规格：   48T/96T   英文缩写：   HA

9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene  中文名：9,9-双(4-羟苯基)芴  分子式：C25H18O2    甲型H3N2HA1   英文名称：   Influenza A H3N2 HA1   规格：   48T/96T   英文缩写：   H3N2 HA1

9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  中文名：9,9-双(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式：C27H24N2    生长激素   英文名称：   growth hormone   规格：   48T/96T   英文缩写：   HGH
兔子白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  6-Aminouracil  873-83-6  中文名：6-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2  度：98.0%   

兔子白介素1β(IL-1β)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Benzyloxypurine  57500-07-9  中文名：6-苄氧基嘌呤  分子式：C12H10N4O 

兔子白介素10(IL-10)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  6-Aminouracil  873-83-6  中文名：6-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2 

兔子白介素10(IL-10)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              6-Benzyloxyindole  中文名：6-苄氧基吲哚  分子式：C15H13NO 

兔子白介素1(IL-1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  6-Aminoquinoxaline  中文名：6-氨基喹喔啉  分子式：C8H7N3  度：98.0%
解没食子酸链球菌PCR检测试剂盒说明书MCF-7 [MCF7], 人癌细胞系阿非迪霉素；艾菲地可宁质量规格：>98%,美国进口Aphidicolin from Nigrospora oryzae

96-C细胞，低转移细胞 人细胞,PC-3细胞 人膀胱基质成纤维细胞总RNAHBdSF NA京尼平质量规格：>98%,BRGenipin

非洲绿猴肾细胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7桔梗皂苷D(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Platycodin D

AHSG Others Mouse 小鼠 Fetuin-A / AHSG 人细胞裂解液 (阳性对照) 菊苣酸（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Cichoric Acid

小鼠网织细胞;M5076金胺O质量规格：BSAuramine O
小鼠色素瘤细胞;B16D-Val-Leu-LysPNAo2HC1D-缬酰-L-亮酰-L-赖酰1克BR，98%

GP1BB Others Human 人 GP1Bβ / CD42c 人细胞裂解液 (阳性对照) 3,3’4,4’-联本四羧醋二酐 3,3',4,4'-Biphqnyltqtrcccrboxylic dicnhydridq 40-87-3

人肺巨细胞癌高转移细胞株;PG-BE1DL-Lysinemonoxy7nochlorideDL-氢录赖酸100克BR，99%

CLEC10A Others Mouse 小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 人细胞裂解液 (阳性对照) 二甲基硅油，英文名或英文缩写：Dimetxylsilicone fluid，级别：GR，85%，规格：10克

COLO320/DM 人细胞NiacinassayMedium 100g原装 BD 232210
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。