PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：柯拉松血吸虫PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

5-Benzyl-1H-tetrazole  18489-25-3  中文名：5-苄基-1H-四唑  分子式：C8H8N4O    计数液   Alkaline phosphatase stain

Benzyl 4-hydroxybenzoate  94-18-8  中文名：4-羟基苯甲酸苄酯  分子式：C14H12O3       Acid phosphatase stain

(-)-Noe's Reagent  108031-79-4  中文名：(-)-核欧沃豪斯效应试剂  分子式：C24H38O3    定性测试盒   Acid esterase stain               

2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane  2024-88-6  中文名：2,2-双(4-氯甲酰氧苯基)丙烷  分子式：C17H14Cl2O4    嗜肺军团杆菌(LP)核酸检测试剂盒   48T

3,6-Bis(hydroxymethyl)durene  7522-62-5  中文名：3,6-双(羟甲基)杜烯  分子式：C12H18O2    绿脓杆菌(PA)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T
兔p物质(SP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide  83846-85-9  中文名：4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚  分子式：C20H16OS  度：98.0%   

兔p物质(SP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile  中文名：  分子式：C7H5ClN2O2 

兔p53(p53)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide  83846-85-9  中文名：4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚  分子式：C20H16OS 

兔p53(p53)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde  231278-84-5  中文名：  分子式：C26H17ClFN3O3 

兔I型胶原(rabbit Collagen I)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Aza-*ndrostan-1-ene- 3-one-17carboxylic acid  140700-63-6  中文名：  分子式：C19H27NO3  度：98.0%  关键词：
柯拉松血吸虫PCR检测试剂盒供应OLFM4 Others Human 人 OLFM4 / Olfactomedin-4 人细胞裂解液 (阳性对照) 氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )质量规格：D,99.9%Dimethyl Sulfoxide-D6

CM-H053人细胞完全培养基100mL氘代DMSO-D6(10 g )质量规格：D,99.8%+TMS 0.03%Dimethyl Sulfoxide-D6

DIRAS3 Others Human 人 ARHI / DIRAS3 人细胞裂解液 (阳性对照) 蛋白酶K(进分)质量规格：≥30units/mg protein,sigma分装Proteinase K

人海马星形胶质细胞HA-h蛋白酶K(Sigma)质量规格：≥30units/mg protein,sigma原装Proteinase K

Hs 181.Tes细胞，正常人细胞 人癌细胞,HCC1937细胞 平滑肌细胞培养基SMCM-sf胰凝乳蛋白酶抑制剂质量规格：进分Chymostatin
人脂肪微内皮细胞HAMEC抗坏血酸；维生素C质量规格：AR;>99%Ascorbic acid；vitamin C

CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人细胞裂解液 (阳性对照) 维生素C(标准品)质量规格：含量测定Ascorbic acid；vitamin C

非洲绿猴肾细胞;VERO十八胺; 十八烷基胺; 硬脂胺质量规格：AROctadecanamine

NCI-H157细胞，人非小细胞 小鼠细胞,S-180细胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮细胞完全培养基100mL山梨酸质量规格：AR,99%Sorbic acid

RAW 264.7(小鼠单核巨噬细胞细胞) 5×106cells/瓶×2DL-薄荷醇质量规格：HPLC≥98%，标准品DL-Menthol
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。