PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：肯塔基沙门氏菌PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

4β-Hydroxywithanolide E  中文名：4β-羟基醉茄内酯E  分子式：C28H38O8    植物二(MDA)测定试剂盒(比色法)

4-Oxododecanedioic acid  中文名：  分子式：C12H20O5    维生素E（VitaminE）测定试剂盒（比色法）

4-O-(3-nitropropanoyl)corollin  中文名：  分子式：C18H24N4O18    超微量Na+K+–ATP酶测定试剂盒                 

4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid  中文名：  分子式：C8H8N2O4    氧化酶（XOD）测试盒   紫外分光光度法   50管/48样

4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic acid  中文名：  分子式：C12H14N2O2    葡萄糖氧化酶（GOD）测试盒   可见分光光度法   50管/48样
杆菌(YP)核酸检测试剂盒   48T  3β-Hydroxyergost-5-en-7-one  156767-69-0  中文名：  分子式：C28H46O2 

噬中性及细胞活化肽 -2(NAP-2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Testosterone isocaproate  中文名：异己酸睾酮  分子式：C25H38O3 

噬酸性粒细胞趋化因子 -2(Eotaxin-2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol  3090-70-8  中文名：3-乙?；?/span>-5α-雄烷二醇  分子式：C21H34O3  度：98.0%   

嗜酸性粒细胞阳离子蛋白   英文名称：   eosinophil cationic protein   规格：   48T/96T   英文缩写：   ECP  3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  14858-07-2  中文名：  分子式：C28H44O3  度：97.0%  关键词：  灵芝; 麦角甾烷; 对照品; 标准品; 微生物代谢产物; 天然产物; 天然产物库

嗜酸性粒细胞趋化因子 (Eotaxin)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 Biosource  3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one  88191-14-4  中文名：  分子式：C28H44O4  度：97.0%  关键词：  灵芝; 麦角甾烷; 对照品; 标准品; 微生物代谢产物; 天然产物; 天然产物库
肯塔基沙门氏菌PCR检测试剂盒说明书PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸柔红霉素(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Daunorubicin HCl

人少突胶质细胞HO盐酸柔红霉素(进口)质量规格：USP,进分sigmaD8809 Daunorubicin HCl

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人细胞，A-704细胞 AGS(胃腺癌细胞)达格列嗪;达格列净质量规格：>97%，BR，生化试剂级Dapagliflozin

人神经母细胞瘤细胞;SH-SY5Y甘草查而酮 A(标准品)质量规格：含量≥98.0%，标准品Licochalcone A

FGF18 Others Mouse 小鼠 FGF18 / FGF-18 人细胞裂解液 (阳性对照) 三氯卡班质量规格：>98.0%Triclocarban
人神经星形胶质细胞完全培养基 100mLSBES；2-溴乙基磺酸钠质量规格：>98.5% 2-bromoethanesulphonate

JB6-C41细胞，小鼠皮肤细胞 SHG44(细胞) 犬肾细胞系/野生型;MDCK/wildBICINE；N,N-二羟乙基甘氨酸质量规格：>99%BICINE

EFNA1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 标签)BES  salt; N,N-二(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸钠质量规格：>99%BES  Salt

LS 180(人腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 原代上皮细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1mlBES free acid; N,N-(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸质量规格：>99%BES free acid

人上皮细胞HBEpiCBz-2'-脱氧胞苷亚1酰胺单体质量规格：>98%Bz-dC Phosphoramidite
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。