【产品名称】: 猪捷申病毒PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Porcine Teschovirus(PTV)RTPCR
【货号】: BKP4226

【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制

酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

猪捷申病毒PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板?？芍苯佑昧俅脖瓯救缪?、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

3,3'-Sulfonyldianiline  599-61-1  中文名：3,3'-二氨基二苯砜  分子式：C12H12N2O2S    谷胱甘肽过氧化物酶   英文名称：   glathione peroxidase   规格：   48T/96T   英文缩写：   GSH-Px

1,4-Bis[2-(4-methyl-5-phenyloxazolyl)]benzene  3073-87-8  中文名：1,4-二[2-(4-甲基-5-苯基恶唑基)]苯  分子式：C26H20N2O2    谷胱甘肽过氧化物酶   英文名称：   glathione peroxidase   规格：   48T/96T   英文缩写：   GSH-Px

Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane  105391-33-1  中文名：双(3-乙基-5-甲基-4-马来基苯基)甲烷  分子式：C27H26N2O4    生长激素结合蛋白 (P)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Bisphenol P  2167-51-3  中文名：双酚P  分子式：C24H26O2    半乳糖凝集素 -3(Galectin-3)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

(+)-Noe's reagent  87248-50-8  中文名：(+)-核欧沃豪斯效应试剂  分子式：C24H38O3    脑神经相关生长蛋白 -43(GAP-43)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
内皮细胞合酶 (eNOS)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     Oxandrolone  53-39-4  中文名：氧甲氢龙  分子式：C19H30O3 

内皮素受体A   英文名称：   Human Endothelin Receptor A   规格：   48T/96T   英文缩写：   EA  2''-O-Acetylsprengerinin C  中文名：  分子式：C46H72O17 

内皮素 -1(Endothelin-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Oxandrolone  中文名：氧甲氢龙  分子式：C19H30O3 

腺来源的内皮生长因子   英文名称：   endocrine gland-derived vascular endothelial growth factor   规格：   48T/96T   英文缩写：   EG-VEGF  β-Sitosterol  83-46-5  中文名：β-谷甾醇  分子式：C29H50O  度：98.0%  关键词：  豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

内啡肽 - b (Endorphin- b )   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Oxandrolone  53-39-4  中文名：氧甲氢龙  分子式：C19H30O3  度：98.0%  关键词：
T24-EGFP(CMV-EGFP慢病毒构建稳定株)人细胞 T24-EGFP (CMV-EGFP leiviral consuct stable sain) of human bladder cancer cells 1640+10% FBS氟吡禾灵（标准品）质量规格：分析标准品Haloxyfop

IL12A Protein Human 重组人 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 标签)吡虫啉（标准品）质量规格：分析标准品,98.5%Imidacloprid

人平滑肌细胞 (HBVSMC)( 5×105 ) 人脐动脉内皮细胞 MCF-7(MCF7)(ATCC来源), 人癌细胞拉帕替尼质量规格：>98.5%,可用于细胞培养Lapatinib base

CM-R049大鼠子宫内膜上皮细胞完全培养基100mL左炔诺孕酮质量规格：>98%,USP33,可用于细胞培养Levonorgestrel

PROCR Others Rat 大鼠 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照) 左炔诺孕酮（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Levonorgestrel
猪捷申病毒PCR检测试剂盒说明书CCL13 Protein Human 重组人 CCL13 / MCP-4 蛋白 (His 标签)6α-羟基布地奈德质量规格：美国进口6α-Hydroxy Budesonide

MDA-MB-231(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人细胞裂解液 (阳性对照) 6β-羟基布地奈德质量规格：美国进口6β-Hydroxy Budesonide

豚鼠胚胎细胞;104C1亚叶酸钙水合物质量规格：美国进口Folinic acid calcium salt hydrate

CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人细胞裂解液 (阳性对照) 喜树碱钠盐质量规格：美国进口 Camptothecin

脑成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)布比卡因碱,丁吡卡因质量规格：>98%Bupivacaine base
PCR检测试剂盒

猪捷申病毒PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。