基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： A549/Taxol 直销
简称：人紫杉醇耐药株

种属：Human

来源：

培养基：培养基: RPMI1640+10%FBS+P/S+Taxol 20ng/ml 消化液 0.25%胰蛋白酶+0.53mMol/L EDTA    培养条件 二氧化碳培养箱:温度 37℃,5%的二氧化碳

状态：客户收到细胞后按照下面的要求操作：     1、检查包装是否有漏液污染等问题，并对收到的细胞做显微镜镜检，拍照留存，贴壁细胞经长途运输可能会有部分漂起， 属于正常现象；  2、静置二氧化碳培养箱中 2-3 小时，观察是否贴壁； 3、可使用 RPMI1640，1

使用方法：
收到细胞A549/Taxol 直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

钨酸1克保存：-20℃  中心体纺锤体极相关蛋白1(CSPP1)ELISA试剂盒 ，英文名： CSPP1 ELISA Kit

StarchPotato 100g/2kg原装 Sigma S4251  Humanurokinase,UKELISA试剂盒人尿激酶(UK)ELISA试剂盒规格：96T/48T

色酸肉汤shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光250毫升  ELISAKitAsAb小鼠抗抗体规格：48T/96T

4-肖基邻本二酰亚安 4-nitnophthclimidq 89-40-7  Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISAKit人抗巨细胞病毒抗体IgM(ai-CMVIgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

去氧胆酸盐枸橼酸盐琼脂shēng huà shì jì容量：100克  人抗组蛋白(H2A-H2B)-DNA抗体/抗二聚体-DNA抗体ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
葡甲，英文名或英文缩写：Meglumine，级别：高纯，98%，规格：5毫克  Rabbitmaixmetalloproteinase2/GelatinaseA,MMP-2ELISA试剂盒兔基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-Serine 25g/100g/250g/500g 国产  小鼠白介素28A(IL28A)ELISA试剂盒 ，英文名： IL28A ELISA Kit

D-GalactosamineHC1D-半乳糖胺盐酸盐5KU高纯，98%  人游离β绒毛膜激素(f-βhCG)ELISA检测试剂盒humanfreechorionicgonadoopin,f-βhCGELISAKIT 96T/48T

甜菜减;甘安醋三安内盐;三铵内盐 Bqtcinq;Lycinq;Glycocoll bqtcinq;Glycinq bqtcinq;TriMqthyl glycocoll cnhydridq;Oxynqurinq;DiMqthyl scrcosinq;(CcrboxyMqthyl)triMqthyl cMMoniuM xy7nochloridq innqr sclt;1-Ccrboxy-N,N,N-triMqthylMqthcncMiniuM innqr sclt;Bqtcinq cnxy7nous 107-43-7  大鼠抗弓形虫IgM抗体免疫试剂盒 Rat ai-toxoplasmosis IgM Aibody ELISA kit

1唑蓝 (培养级) Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide (ce... 298-93-1 100MG 染色剂  英文名称RatC3aELISAKit大鼠补体片断C3a(C3a)规格：96T/48T
碱性嶙酸酯酶，英文名或英文缩写：CIAP，级别：BR，RZ>3,≥300u/mg，规格：5克  人AT丰富结合域1A(ARID1A)免疫试剂盒 Human ARID1A ELISA Kit

 300目(易)英文名称MouseIerleukin-6ELISAKIT小鼠白介素6(IL-6)规格：96T/48T

RIBORESERVERNASTORAGESOLUTIONRNA贮存液生物技术级无色透明溶液COLDsigma  冰冻切片制片预处理脱水液100毫升

1,6-二果糖一钙盐 D-Fructose-1,6-diphoshate calcium salt 103213-33-8 5G 通用试剂  RatCaveolin-1,Cav-1ELISA试剂盒大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

富马醋;反二醋;;紫堇醋;1，2-烯二羧醋 FuMcric ccid;Bolqtic ccid;Lichqnic ccid;trcns-1,2-qthylqnqdiccrboxylic ccid 110-17-8  小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
A549/Taxol 直销蛋白?；ぜ?/span>TYshēng huà shì jì容量：5克  冰冻切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP基础检测试剂盒(无一抗和二抗)50次

D-Glucose-1-PhosphateNa2 250mg/1g/5g/25g原装 Sigma G7000  RatAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISA试剂盒大鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

硅酸钠1克  小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

姆沙伯 101 Chromosorb 101  Rat vitamin K1 (VK1) ELISA Kit 大鼠维生素K1(VK1)ELISA试剂盒

聚乙二醇 3350 Poly(ethylene glycol) 3,350 (PEG 3350) 25322-68-3 100G 通用试剂  Humanacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 人乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装