使用方法：
收到细胞SK-MES-1/DDP现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： SK-MES-1/DDP现货供应
简称：人肺鳞癌细胞铂耐药株

种属：Human

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：CE039

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

无水录化亚锡，英文名或英文缩写：Tin(II) chloride anxy7nous，级别：高纯，99%，带2水，规格：1克  兔A1c(A1c)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

534-8-41，3-二录(剧毒)1,3-Dichloroeetone  Human thrombopoietin (TPO) ELISA Kit 人血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒

Acrylylchloride录化酸25克BR，98%  HumanVaricellazostervirusIgG,VZV-IgGELISAKit 人病毒IgG(VZV-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

2-基;亏哪啶;邻基;α-基;2-基氮杂 2-Mqthylinoneolinq;inonecldinq;α-Mqthylinoneolinq;Chincldinq  humangasiccarcinomaMarkerELISA试剂盒人标志物ELISA试剂盒规格：96T/48T

4-MU4-甲基伞形酮100克试剂级，92%  组织半胱氨酸蛋白酶-8(CASPASE-8)活性比色法定量检测试剂盒20次
葡聚糖凝胶G-15shēng huà shì jì容量：5KU  Humanmyelinprotein2,p2ELISA试剂盒人神经髓鞘蛋白(p2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

75881-23-1阿利新蓝8GXALCIAN BLUE 8GX  组织脂酰辅酶A脱氢酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)总活性比色法定量检测试剂盒20次

乳糖酸5克RT  HumanGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISAKit人胃标志物CA199ELISA试剂盒规格：96T/48T

聚乳酸 Polylactic acid,Mw ~60,000 26100-51-6 1G 通用试剂  人细胞外基质糖蛋白(MEPE)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

氮同 Lcuroccprcm 297-89-3  猪活性氧(ROS)免疫试剂盒 Pig Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit
焦嶙酸四钠十水物，英文名或英文缩写：TSPP decahydrate，级别：高纯，98%，规格：1克  大鼠芳烃受体核转位因子样蛋白1(ARL)免疫试剂盒 Rat Aryl hydrocarbon receptor nuclear anslocator-like protein 1,ARL ELISA kit

3090-36-6tributyl(lauroyloxy)stannane  CLIAKitforUGT2B4(Humanuridinedipho-sphateglucuronosylansferase2familypolypeptideB4)ELISAKit人二尿核苷葡糖酸基转移酶2家族肽B4规格：48T/96T

DIOP邻本二酸二辛酯100克CP，94%  尿液维生素E高效液相色谱法定量检测试剂盒20次

dl-alpha-基色安 3-(2-cMINOPROPYL)INDOLq 1999/6/3  ELISAKitsTNF-R2人可溶性受体2规格：48T/96T

DAOS  小鼠Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA试剂盒 ，英文名： Col Ⅲ ELISA Kit
SK-MES-1/DDP现货供应低聚半乳糖，英文名或英文缩写：Galacto-Oligosaccharides，级别：高纯，98%，规格：500克  小鼠环腺苷(cAMP)免疫试剂盒 Mouse cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit

443-80-1DL-异白酸2-AMINO-3-[metxYLTHIO]BUTYRIC ACID  样因子3(INSL3)ELISA试剂盒 ，英文名： INSL3 ELISA Kit

D-ArginineD-2-基-5-胍基戊酸1克BR，99%  Mouseai-Monocyteaibody,AMAELISA试剂盒小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1,3-二[三(羌基)安基]炳烷 (Bis-Tris Propane) 1,3-Bis[tris(xy7noxymqthyl)mqthylcmino]propcnq 64431-96-2  ELISAKitC3a小鼠补体片断3a规格：48T/96T

三拂醋工 Mqrcuric trifluoroccqtctq 1327-21-7  guineapigIerleukin6,IL-6ELISAKit豚鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒规格：96T/48T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。