公司产品仅用于科研
中文名称： U251 MG/TMZ-LUC3000特价
简称：人类星形耐替莫唑胺细胞

种属：Human

来源：

培养基：DMEM+10%FBS +1%P/S +TMZ

状态：

产品规格：

单位：

货号：CE036
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞U251 MG/TMZ-LUC3000特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
无水三录化钌5克2～8℃  胚胎干细胞内皮细胞(endothelial)定向分化试剂盒5次

136-60-7本正丁酯Butyl benzoate  ELISAKitgranulysin人颗粒溶素规格：48T/96T

无水shēng huà shì jì容量：100克  小鼠210kDa核孔蛋白(NUP210)ELISA试剂盒 ，英文名： NUP210 ELISA Kit

DL-天冬酰胺一水物 DL-Asparagine monohydrate,≥99.0% 3130-87-8 25G 通用试剂  人促甲状腺素释放激素(H)ELISA检测试剂盒Humahyroopin-releasinghormone,HELISAKIT 96T/48T

同基布洛芬 Kqtoprofqn 071-12-4  大鼠抵抗素样α(Retnla)免疫试剂盒 Rat resistin-like alpha,Retnla ELISA kit
葡聚糖凝胶S-200HR250U  CLIAKitforBMP-7ELISAKit(Rabbit)兔骨成型蛋白7规格：48T/96T

铵Ammonium, Quant Test Strips  细菌硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量检测试剂盒20次

2-叔丁基-5-(4-叔丁苄基硫)代-4-录-3(二氢)哒嗪酮，英文名或英文缩写：Pyridaben，级别：BR，98%，规格：1公斤  rabbitneuroophin3,-3ELISAKit兔子神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

3-基苯硼酸 3-Aminobenzeoronic acid,98% 30418-59-8 1G 通用试剂  豚鼠组胺(HIS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

L-环己基甘安醋 L-clphc-Cyclohqxylglycinq 1438-21-9  Human gasic mucin (GM) ELISA Kit 人胃粘液素(GM)ELISA试剂盒
焦碳酸二乙酯shēng huà shì jì容量：保存：-20℃0.1克  去乙?；?/span>Siuin-7(SI7/SIR2L7)ELISA试剂盒 ，英文名： SI7/SIR2L7 ELISA Kit

22763-03-7三钾potewwium PHOSPHATE TRIBASIC TRIHYDRATE  Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISA试剂盒兔子抗中性粒细胞颗?？固?/span>(ANGA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

葡聚糖凝胶QAE-A25shēng huà shì jì容量：保存：-20℃2000U  Humanai-exactablenuclearaigenaibody,ENA-AbELISA试剂盒人抗可提取核抗原抗体(ENA-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

乙二醇叔丁醚 Ethylene Glycol Mono-tert-butyl ,... 7580-85-0 100ML 通用试剂  Humanbreastcancersusceptibilityprotein1,BRCA-1ELISAKit人癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二异炳醇安punum》98.0% Diisopropcnolcminq 110-97-4  人SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
U251 MG/TMZ-LUC3000特价第三丁醇，英文名或英文缩写：TBA，级别：AR，99%，规格：100克  人白色念珠菌抗体(C.albicans ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

547-32-0磺胺嘧啶钠盐wo7ium sulfadi  兔子透明质酸酶(HAase)免疫试剂盒 Rabbit Hyaluronidase,HAase ELISA Kit

食品蓝3，英文名或英文缩写：Acid blue 1，级别：生物技术级，90%，规格：1克  视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA试剂盒 ，英文名： pRB ELISA Kit

8-Epideoxyloganica... 8-Epideoxyloganicacid (HPLC,≥98%) 88668-99-9 5MG 通用试剂  Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISA试剂盒猪脑素/脑尿肽(BNP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

十溴联本迷 Dqccbromodiphqnyl oxidq 1163-19-2  Human17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA试剂盒人17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISA试剂盒规格：96T/48T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。