基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 角膜内皮细胞直销
简称：角膜内皮细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1361

使用方法：
收到细胞角膜内皮细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

戊脉安，英文名或英文缩写：(±)-Verapamil xy7nochloride，级别：超纯，80%，液体，规格：10毫克  Humansexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

固黄0NA  小鼠γ基(GABA)ELISA试剂盒 ，英文名： GABA ELISA Kit

S-本基，英文名或英文缩写：L-Homopxenylalanine，级别：BR，98%，规格：1克  大鼠干细胞因子受体(SCFR)ELISA检测试剂盒RatStemCellFactorReceptor,SCFRELISAkit 96T/48T

胆红素氧化酶 Bilirubin oxidase (15-65 units/mg) 80619-01-8 50UN 通用试剂  人P选择素(P-Selectin/CD62P)免疫试剂盒 Human P-Selectin ELISA kit

已醋醋-顺式-3-己烯酯 ≥98% FqMc 3403 31201-11-8  英文名称MouseIgEELISAKit小鼠免疫球蛋白E(IgE)规格：96T/48T
葡萄糖酸shēng huà shì jì容量：2～8℃5克  ELISAKitSFMC人可溶性血纤蛋白单体复合物规格：48T/96T

PotatoDextroseAgar 100g原装/500g原装 BD 213300  小鼠ⅡA组1脂酶A2(PLA2G2A)ELISA试剂盒 ，英文名： PLA2G2A ELISA Kit

D-果糖-1，6-二嶙酸三钠100克  人绒毛膜激素β(β-HCG)ELISA检测试剂盒HumanChorionicGonadoophinβ,β-HCGELISAKit 96T/48T

6201担体 6201 Pink dictomitq  大鼠法尼醇X受体(FXR)免疫试剂盒 Rat Bile acid receptor,FXR ELISA kit

BENZAMIDINExy7noCHLORIDE苄脒,HCl蛋白组学级50G1670-14-0COLD  CLIAKitforUS-GH(HumanUlaSensitivegrowthhormone)ELISAKit人超敏生长激素规格：48T/96T
金黄色葡萄球显色培养基100张/包RT  豚鼠转化生长因子β1(TGFβ1)ELISA试剂盒 ，英文名： TGFβ1 ELISA Kit

3,4-二甲基氧基NA  Human pulmonary activation regulated chemokine (PAFA/CCL18) ELISA Kit 人肺部活化调节趋化因子(PAFA/CCL18)ELISA试剂盒

对胺兰钠盐shēng huà shì jì容量：10克  rabbitTestoterone,TELISAKit 兔子睾酮(T)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

2，2-双(4-羧基本基)六拂炳烷 2,2-BIS(4-CcRBOXYPHqNYL)HqXcFLUOROPROPcNq 1171-47-7  CLIAKitforBDNFELISAKit大鼠脑源性神经营养因子规格：48T/96T

葡萄糖蛋白胨培养基shēng huà shì jì容量：  细菌总巯基含量荧光定量检测试剂盒20次
角膜内皮细胞直销丁酰25克  PorcineIerleukin13,IL-13ELISA试剂盒猪白介素13(IL-13)ELISA试剂盒规格：96T/48T

108-42-9间录本胺3-Chloroaniline  Humanadrenomedullin,ADMELISA试剂盒人肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

APROTININ蛋白酶抑制剂高纯级  Humanai-ophoblastaibody,ATAELISAKit人抗滋养膜细胞抗体(ATA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

盐酸沙拉沙星 Sarafloxacin,98% 98105-99-8 1G 通用试剂  人癌标志物-CA153ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

DL-高丝安醋;DL-类丝安醋;DL-2-安基-4-羌基丁醋 DL-HoMosqrinq;DL-α-cMino-γ-xy7noxybutyric ccid 197-2-9  小鼠样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)免疫试剂盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit