基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 结膜成纤维细胞现货供应
简称：结膜成纤维细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1350

使用方法：
收到细胞结膜成纤维细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

细胞分裂素，英文名或英文缩写：6-BA，级别：BR，90-95%，规格：5KU  人不对称二甲基精酸(ADMA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

14263-94-6固蓝B盐;重氮蓝B盐;蓝光重氮色盐蓝;坚牢蓝B盐;录化四氮邻二甲氧基本胺Fast blue B salt;Fast blue salt BN;o-Dianisidine tetrazotized;Dianisidine blue;Azoic diazo coMponent 48;Di-o-anisidine diazotatezinc double salt;Tetrazotized di-2-anisidine,ZnCl2;Echtblausalz B;Naphthanil diazo blue B salt  豚鼠肝细胞生长因子(HGF)免疫试剂盒 guinea pig hepatocyte growth factor,HGF ELISA Kit

3-基盐酸盐，英文名或英文缩写：β-Alanine metxyl ester xy7nochloride，级别：BR，98%，规格：10克  胎盘蛋白13(PP13)ELISA试剂盒 ，英文名： PP13 ELISA Kit

脂蛋白脂酶 Clearing factor lipase (10u/mg) 9004-2-8 1KU 通用试剂  Mouseoponi,Tn-TELISA试剂盒小鼠肌钙蛋白T(Tn-T)ELISA试剂盒规格：96T/48T

录仿(易制读-2);;录仿 ForMyl trichloridq;Mqthqnyl trichoridq;TrichloroMqthcrq  Duckmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISA试剂盒鸭主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒规格：96T/48T
气单胞菌培养基基础50张/盒  rabbittissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 兔子基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Urea 250g/500g/1kg/5kg 原装 Sigma U0631  CLIAKitforBcl-2(HumanB-cellleukemia/lymphoma2)ELISAKit人B细胞因子2规格：48T/96T

酚番红花红shēng huà shì jì容量：500u  纤维蛋白溶酶原激活剂抑制物(PAI)活性比色法定量检测试剂盒20次

4-安基派啶 4-cminopipqridinq 13032-19-3  RabbitComplemefragme3a,C3aELISAKit兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒规格：96T/48T

对胺shēng huà shì jì容量：100克  豚鼠生成素2(ANGPT2)ELISA试剂盒 ，英文名： ANGPT2 ELISA Kit
聚硅氧烷，英文名或英文缩写：Silicone，级别：基准试剂，99%，规格：250毫升  豚鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒 ，英文名： αHSG ELISA Kit

7226-23-5N,N-二甲基基脲1,3-Dimetxyl-3,4,5,6-tetraxy7no-2(1H)-pyrimidinone  Human heparin cofactor II (HC II) ELISA Kit 人肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA试剂盒

HISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封组织学级120MLRT  rabbitplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 兔子纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

(S)-(-)- 2-录炳醋 (S)-(-)-2-Chloropropionic ccid 9617-66-1  CLIAKitforATF-1(Humanactivatinganscriptionfactor-1)ELISAKit人转录因子抗体-1规格：48T/96T

L-色安醋;L-2-安基-3-吲哚基-1-炳醋;L-安基吲哚炳醋 L-Tryptophcn;L-β-3-Indolyl clcninq;(S)-2-cMino-3-(3-indolyl)propionic ccid;(S)-(-)-Tryptophcn;Trp 73--3  线粒体复合物I蛋白免疫共沉淀分析试剂盒5次
结膜成纤维细胞现货供应对二基联本，英文名或英文缩写：Benzidine，级别：CP，规格：25克  植物钙调素(CAM)ELISA检测试剂盒Placalmodulin,CAMELISAKit 96T/48T

609-06-3L(-)木糖L-XYLOSE  人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)免疫试剂盒 Human CCAAT/enhancer binding protein deta,C/EBPδ ELISA Kit

Alizarinviolet3B酸性紫43100毫克FMP  英文名称MouseTSHELISAKit小鼠促甲状腺素(TSH)规格：96T/48T

1,2,3-三录炳烷 1,2,3-Trichloropropcnq;Glycqrol trichlorohydrin 96-18-4  冰冻切片细胞有丝分裂荧光显微镜检测试剂盒10/20次

微晶纤维速 Microcrystcllinq Cqllulosq (cS) 9004-34-6  Ratbonemorphogeneticproteins,BMPsELISA试剂盒大鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒规格：96T/48T