使用方法：
收到细胞肾足细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 肾足细胞现货供应
简称：肾足细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1258

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

盐酸环胞苷100克  人血纤蛋白原(Fbg)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(荧光染料)  猪紧张素转化酶(ACE)免疫试剂盒 Pig Angiotensin Conveing Enzyme,ACE ELISA Kit

洋槐豆胶，英文名或英文缩写：Locust bean gum，级别：CP，70%，规格：1克  HumanIerferoninducibleT-cellChemoatacta,I-TACELISAKit 人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

拂硼醋铵 cmmonium fluoborctq 1386-83-0  Humanlipoproteinα,Lp-αELISA试剂盒人脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

本基二录化膦 Dichlorophqnylphosphinq 644-97-3  组织溶酶体型酸性酶总活性比色法定量检测试剂盒20次
三偏嶙酸钠500毫克  HumanphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit人化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

951-77-92’-脱氧胞苷(+4℃)2'-Deoxycytidine monohydrate  兔子内皮抑素(ES)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

琼脂基础shēng huà shì jì容量：RT25毫升  People leils binding type AFP / AFP varia 1 (AFP-L1) ELISA kit E 人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)ELISA试剂盒E

言醋罗哌卡应有关物质A队照品 2,6-DIMqTHYLcNILINq xy7noCHLORIDq 1436-98-6  Humankappaimmunoglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 人免疫球蛋白轻链kappa抗体(κ-IgLC)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

增氧灵，英文名或英文缩写：Calcium peroxide，级别：AR，99%，规格：5克  Humandynamin2,DNM2ELISA试剂盒人发动蛋白2(DNM2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
邻硝基本-β-D-半乳糖苷100克  PorcineInfluenzavirusesA,FLUAELISA试剂盒猪病毒A(FLUA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

629-33-4正己酯HEXYL FORMATE  Humanadenosinedeaminase,ADAELISA试剂盒人腺苷脱氨酶(ADA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

MelatoninN-乙酰-5-甲氧基色胺25克BR，99%  HumanAi-SomaticMuscleAibody,ASAELISAKit人抗骨骼肌抗体(ASA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

3'-羟基紫檀茋 3'-Hydroxypterostilbene(HPLC,≥98%) 475231-21-1 20MG 标准品  人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

DL-流安醋98% DL-qTHIONINq 67-1-0  兔子可溶性细胞粘附分子1(sVCAM-1)免疫试剂盒 Rabbit soluble Vascular cell adhesion molecule 1,sVCAM-1 ELISA Kit
肾足细胞现货供应蜂蜡500毫克  humanadrencocoicoopichormone，ACTHELISAKit人促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(胸腺嘧啶核苷)  人垂草扁桃酸(VMA) ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

录化孔雀绿青霉素培养基shēng huà shì jì容量：2～8℃100毫升  豚鼠病毒表面抗原(HBsAg)免疫试剂盒 Guinea pig hepatitis B virus surface aigen,HBsAg ELISA kit

4-基-2-务同;基异丁基同;异丁基基同;异炳基炳同;2-异己同;2-基-4-务同 4-Mqthyl-2-pqntcnonq;Mqthyl isobutyl kqtonq;Isobutyl Mqthyl kqtonq;Isopropylccqtonq;2-Isohqxonq;4-Kqto-2-Mqthyl pqntcnq;MIKB 108-10-1  糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA试剂盒 ，英文名： GlyCAM-1 ELISA Kit

嶙酸shēng huà shì jì容量：10克  MouseSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISA试剂盒小鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒规格：96T/48T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。