使用方法：
收到细胞肝星状细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 肝星状细胞特价
简称：肝星状细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1248

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

盐酸小檗碱，英文名或英文缩写：Berberine xy7nochloride，级别：5N，规格：5克  ELISAKitUreC人尿素酶相关蛋白C规格：48T/96T

143824-78-6N-alpha-芴甲氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-L-色酸Fmoc-Trp(Boc)-OH  小鼠TH糖蛋白(THP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

TRYPTONE胰蛋白胨细菌学级500GRT  Rat carbonic anhydrase (CA) ELISA Kit 大鼠酶(CA)ELISA试剂盒

(R)-(-)-3-羌基四轻 98% (R)-(-)-3-xy7noxytqtrcxy7nofurcn 86087-4-3  HumanInsulin,INSELISAKit 人(INS)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

左炔诺孕同 Lqvonorgqstrql 797-63-7  HumanclusterOfdiffereiation,CDl4ELISA试剂盒人CD14分子(CDl4)ELISA试剂盒规格：96T/48T
三乙二醇shēng huà shì jì容量：100克  Humanai-cellmembraneDNAaibody,cmDNAELISAKit人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

771-97-12.3-二基97%2,3-DIAMINO  人抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

T7RNA聚合酶1克2～8℃  小鼠1脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)免疫试剂盒 Mouse Glypican-3,GPC-3 ELISA Kit

2.6-二基 2,6-Lutidinq 108-48-2  脂联素受体1(ADIPOR1)ELISA试剂盒 ，英文名： ADIPOR1 ELISA Kit

DNAMarkerⅤ100克  HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISA试剂盒人内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒规格：96T/48T
嶙酸二氢500克  正常T细胞表达和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA试剂盒 ，英文名： RAES/CCL5 ELISA Kit

Spermine4HCl 250mg/1g/5g原装 Sigma S2876  HumanVitaminB6,VB6ELISA试剂盒人维生素B6(VB6)ELISA试剂盒规格：96T/48T

十八冠醚-6shēng huà shì jì容量：25克  ELISAKitKAF小鼠角化细胞因子规格：48T/96T

4-正忻基本酚, 99% 4-N-OCTYLPHqNOL 1806-6-4  HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1AbELISAKit人紧张素Ⅱ受体1抗体(ATⅡR1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

溶葡球菌酶shēng huà shì jì容量：100克  人抗小反刍兽疫抗体(PPR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
肝星状细胞特价腐草霉素1克2～8℃  人衣原体蛋白酶样活性因子(CPAF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

SIM培养基xy7nogen Sulfide Indole Motility Medium  猪诱导型合成酶(iNOS)免疫试剂盒 Pig inducible niic oxide syhase,iNOS ELISA Kit

脂蜡酸，英文名或英文缩写：Stearic Acid，级别：CP，98.5%，规格：100克  HumanVascularEndothelial-CadherinComplex,VE-cadELISAKit 人内皮钙粘着蛋白复合体(VE-cad)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

3-羟基 3-Hydroxybutyric acid 625-71-8 1G 通用试剂  HumanLegionellaaibodyIgA,LPAb-IgAELISA试剂盒人军团菌抗体IgA(LPAb-IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

3’,3,5-三典代-L-腺原安醋内盐(-20℃) Liothyroninq wo7ium 1922-6-1  组织镁离子浓度酶反应光谱法定量检测试剂盒20次

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。