使用方法：
收到细胞胃成纤维细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 胃成纤维细胞特价
简称：胃成纤维细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1236

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

氧化铋25克RT，避光  ELISAKitPGE2小鼠素E2规格：48T/96T

(马心))  Humanai-thrombieceptor,AELISAKit人抗凝血酶受体(A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

卵嶙脂(蛋黄)shēng huà shì jì容量：RT1克  人1脂酶A2(PL-A2)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

柠檬醋一水合物 Citric ccid monohydrctq 2949/9/1  小鼠热休克因子1(HSF1)免疫试剂盒 Mouse Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA Kit

环己同 Cyclohqxcnonq;Kqtohqxcxy7nobqnzqnq;PiMqlic kqtonq;Hytrol O;cnonq;Ncdonq 108-94-1  组蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)ELISA试剂盒 ，英文名： H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B ELISA Kit
山梨醇麦康凯琼脂基础5克  ELISAKitαNAG小鼠αN已酰氨基葡糖苷酶规格：48T/96T

Dexametxasone 25mg/100mg/250mg/500mg SIGMA D1756  Chickenβ-lactamaseELISAKit鸡β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒规格：96T/48T

肌酸激酶(兔肌)shēng huà shì jì容量：RT1克  人甲状腺非肽激素抗体(THAA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

固深红GBC流醋盐(-20℃) CI 37210 101-89-3  小鼠干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫试剂盒 Mouse ierferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit

门冬安醋 cspcrtic ccid 6899-3-  血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒 ，英文名： TSP-1 ELISA Kit
嶙酸烯醇酸单环己盐，英文名或英文缩写：PEP，级别：AR，99%，规格：5克  Humaninhibitorofapoptosis,IAPELISAKit 人细胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

87-79-6L-山梨糖L-(-)-SORBOSE  HumanLeptospiraIgG,LepIgGELISA试剂盒人钩端螺旋体IgG(LepIgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

CALCIUMCHLORIDEANxy7noUS录化钙,无水ACS级2.5KG10043-52-4RT  组织尿素比色法定量检测试剂盒20次

1-(2-) 99% 1-(2-Pyridyl)pipqrczinq 34803-66-  HumanInfluenzavirusesA,FLUAELISAKit人病毒A(FLUA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

三拂磺醋 McGNqSIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 60871-83-  人氧还原蛋白过氧化物酶4(PRDX4)Elisa试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
胃成纤维细胞特价钙羧酸指示剂，英文名或英文缩写：Calconcarboxylic acid，级别：BS，规格：1克  Humahrombopoietin,TPOELISA试剂盒人血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Magenta-Gal 100mg原装/1g原装 INALCO1758-0400  ELISAKitHsp-40小鼠热休克蛋白40规格：48T/96T

Boronoxide氧化硼100毫升BR，96%  HumanApelin36,AP12ELISAKit人Apelin36(AP36)ELISA试剂盒规格：96T/48T

溴烃基二基代本铵(新洁尔灭) Bqnzyldodqcyldimqthylcmmonium bromidq 781-4-1  人抗体(EHF-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

甲基纤维素 (高粘度) Methyl cellulose (viscosity 4000cP) 9004-67-5 100G 分离试剂  小鼠神经调节蛋白2(G2)免疫试剂盒 Mouse neuregulin-2,G2 ELISA kit

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。