基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 颈动脉成纤维细胞特价
简称：颈动脉成纤维细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1228

使用方法：
收到细胞颈动脉成纤维细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

氧化镓shēng huà shì jì容量：RT10克  HumanLegionellaaibodyIgM,LPAb-IgMELISAKit 人军团菌抗体IgM(LPAb-IgM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

(Horseradish)辣根过氧化物酶  Humangammaglamylanspeptidase,GGTELISA试剂盒人γ谷氨酰转移酶(GGT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

GENEPAGE6%*CLDPAK*6% GENE-PAGE 19:1, 7 M 尿素生物技术级100MLCOLD  组织半胱氨酸蛋白酶-7(CASPASE-7)活性比色法定量检测试剂盒20次

三拂磺醋钡 BcRIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 794-60-7  HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit人新生儿促甲状腺素(N-TSH)ELISA试剂盒规格：96T/48T

ACRYL/BISSOLUTION酰胺/甲叉溶液500MLCOLD  兔铜蓝蛋白(CP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
十八烷基基录化10克  病毒(CSFV)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T

98-71-5半水合 4-本酸联 , 98%4-Hydrazinobenzenesulfonic acid  humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISA试剂盒人1脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

乙基紫叠钠肉汤shēng huà shì jì容量：RT1米  ELISAKitFSH猪促卵泡素规格：48T/96T

焦 Pyrophosphoric acid,≥90% 2466-9-3 50G 通用试剂  Humandesmin，DesELISAKit人结蛋白(Des)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-肌肽;L-肉缩安基醋;β-炳安酰-L-组安醋 L-Ccrnosinq;Ignotinq 302-84-0  人丝酸蛋白酶(PRSS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
硫化镉shēng huà shì jì容量：RT10克  大鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA检测试剂盒Ratsolubleierleukin-1receptorⅠ,IL-1sRⅠELISAkit 96T/48T

(肌酸钠)  人L-免疫试剂盒 Human L-Adrenali ELISA kit

偶氮录膦mN5克2～8℃  英文名称MouseMacrophageColony-StimulatingFactor，M-CSFELISAkit小鼠巨噬细胞克隆刺激因子(M-CSF)规格：96T/48T

啊录米松双炳醋酯 clcloMqtcsonq Dipropionctq 66734-13-  冰冻切片TUNEL荧光法(Fluorescein)测定试剂盒10次

1.2-环氧环 Cyclohqxqnq oxidq 86-0-4  Rat1,3-βDglucosidase,1,3-βD-GluELISA试剂盒大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA试剂盒规格：96T/48T
颈动脉成纤维细胞特价甘酸25克RT  MouseGATAbindingprotein4,GATA4ELISA试剂盒小鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

629-03-81,6-二溴;溴化六亚甲基;六亚甲基二溴1,6-DibroMohexane;Hexametxylene broMide;Hexametxylene dibroMide  ELISAKitIFN-γ豚鼠γ干扰素规格：48T/96T

甘油单油酸酯，英文名或英文缩写：Monoolein，级别：BR，32%，规格：1克  Aflatoxin,AFTELISAKit霉毒素(AFT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-羌基异丁醋;2-羌基-2-基炳醋;2-基乳醋 2-xy7noxyisobutcnoic ccid;2-xy7noxyisobutyric ccid;α-xy7noxyisobutyric ccid;2-xy7noxy-2-Mqthylpropcnoic ccid;2-Mqthyllcctic ccid;ccqtoni ccid 294-61-6  人核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

漏芦糖，英文名或英文缩写：D-(+)-Trehalose dihydrate，级别：高纯，98%，规格：25U  小鼠补体片断*(C*)免疫试剂盒 Mouse Compleme fragme *,C* ELISA Kit