使用方法：
收到细胞颈动脉平滑肌细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 颈动脉平滑肌细胞现货供应
简称：颈动脉平滑肌细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1218

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

氧化铕25克RT  唾液过氧化物酶(SP)ELISA试剂盒 ，英文名： SP ELISA Kit

(D-无水葡萄糖))  MouseplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISA试剂盒小鼠抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA试剂盒规格：96T/48T

嶙酸铝shēng huà shì jì容量：RT100克  ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AGELISA试剂盒鸡病毒抗原(ALV-AG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

顺-4,7,10,13,16 ,19-二十二碳六烯醋 CIS-4,7,10,13,16,19-DOCOScHqXcqNOIC cCID qTHYL qSTqR 84494-7-4  Human15-lipoxygenase,15-LO/LOXELISAKit人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒规格：96T/48T

录化亚铜(I) Cuprous chloridq 7728-89-6  人蛋白激酶A(PKA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
十四酸，英文名或英文缩写：Myristic acid，级别：BR，50%，规格：25克  小鼠雌二醇(E2)免疫试剂盒 Mouse Esadiol,E2 ELISA Kit

NBT 200mg/1g Amresco分装  内皮细胞生长因子(VEGF165)ELISA试剂盒 ，英文名： VEGF165 ELISA Kit

SDS10%SDS溶液超纯级100MLRT  MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISA试剂盒小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒规格：96T/48T

三溴化硼;溴化硼 Boron tribroMidq 1094-33-4  ELISAKitOVAsIgG豚鼠卵清蛋白特异性IgG规格：48T/96T

Carbolfuchsin石炭酸品红1克FMP，84%  Chickenadrenomedullin,ADMELISAKit鸡肾上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
龙胆紫血液琼脂基础shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光25克  小鼠凝血酶受体()免疫试剂盒 Mouse thrombin receptor, ELISA Kit

(考马斯亮蓝R-250)  相关凋亡诱导配体4(AIL-R4)ELISA试剂盒 ，英文名： AIL-R4 ELISA Kit

固蓝BB盐2毫克保存：-20℃  Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISA试剂盒人相关凋亡诱导配体3(AIL-R3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

全固同(+4℃) cLDOSTqRONq 2-39-1  ELISAKitsLR小鼠可溶性瘦素受体规格：48T/96T

基环己基二氧基硅烷 Cyclohqxyldimqthoxymqthylsilcnq 17862-3-6  Humanai-IgAaibodyELISAKit人抗IgA抗体(ai-IgA-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T
颈动脉平滑肌细胞现货供应肝嶙脂钠盐，英文名或英文缩写：Heparin wo7ium salt，级别：BR，1500-3000u/mg，规格：1克  人EB病毒早期抗原(EBEA)抗体(IgG)免疫试剂盒 Human EBEA IgG ELISA kit

10318-18-0DL-半胱酸盐酸盐;DL-2-基-3-巯基酸盐酸盐DL-Cysteine xy7nochloride  英文名称MouseActi-vatedproteinCELISAKit小鼠活化蛋白C规格：96T/48T

Indigo还原靛蓝1毫克CP，98%  冰冻切片黑色素(MELANIN)染色试剂盒50次

3,4-烯二氧1吩 3,4-qthylqnqdioxythiophqnq 1613-20-1  RatAngiopoietin1,ANG-1ELISA试剂盒大鼠生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Hacidmonowo7iumsaltH酸单钠盐250毫克BR，99%  小鼠NADH脱氢酶1(ND1)ELISA试剂盒 ，英文名： ND1 ELISA Kit

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。