公司产品仅用于科研
中文名称： 心肌细胞现货供应
简称：心肌细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1210
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞心肌细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
一次性鞋套100U2～8℃  英文名称MouseNeuroophin-3，-3ELISAkit小鼠神经营养因子-3(-3)规格：96T/48T

95-68-12，4-二2,4-Dimetxyl aniline  TEM电镜石蜡切片免疫组织化学HRP酶联DAB直接检测试剂盒(含HRP一抗)10次

盐酸壮观霉素shēng huà shì jì容量：25克  RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISA试剂盒兔子巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-溴芴 2-Bromofluorqnq 1133-80-8  小鼠白介素3(IL3)ELISA试剂盒 ，英文名： IL3 ELISA Kit

盐酸脲，英文名或英文缩写：Semicarbazide xy7nochloride，级别：实习级，98%，规格：100克  人视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA检测试剂盒Humaetinolbindingprotein,RBPELISAKit 96T/48T
食盐，英文名或英文缩写：wo7ium chloride，级别：超纯，99%，规格：50毫克  HumanHelicobacterpyloriIgM,Hp-IgMELISA试剂盒人幽门螺旋杆菌IgM(Hp-IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(卵清蛋白  组织钙调神经酶(CALCINEURIN;PP2B)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次

Acriflavinexy7nochloride盐酸黄25克BR，99%  Humanmaixexacellularphosphoglycoprotein,MEPEELISAKit人细胞外基质糖蛋白(MEPE)ELISA试剂盒规格：96T/48T

三拂磺醋铜 COPPqR(II) TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 34946-8-  人组织蛋白酶抗体(Cath Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

wo7iumbutyrate正钠1公斤CP，98%  Human hepatitis B virus X protein ieracting protein (HBXIP) ELISA Kit 人病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA试剂盒
录铂酸钾100毫克保存：-20℃  人抗SS-B/La抗体ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

CongoRed 10g/25g/50g/100g原装 Amresco 0379  小鼠肌球蛋白(MYS)免疫试剂盒 Mouse Myosin,MYS ELISA Kit

匹马霉素shēng huà shì jì容量：RT5克  胰素样肽1(GLP-1)ELISA试剂盒 ，英文名： GLP-1 ELISA Kit

十八烷基三基录化铵 cliquct 7 2011/3/8  Mouseai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISA试剂盒小鼠抗心1脂抗体IgM(ACA-IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

环务烷 Cyclopqntcnq 1987/9/3  ELISAKitE3小鼠雌三醇规格：48T/96T
心肌细胞现货供应高录酸shēng huà shì jì容量：RT25克  MouseClusterofdiffereiation30,CD30ELISA试剂盒小鼠CD30分子(CD30)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(焦炭酸二乙脂)  ELISAKitAFU小鼠αL岩藻糖苷酶规格：48T/96T

四盐酸精胺5毫克  Chickenα-Glucosidase,a-GluELISAKit鸡α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA试剂盒规格：96T/48T

本安蓝 CI 42755 8631-66-2  人甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

啊司匹林 cspirin 20-78-  小鼠干扰素调节因子5(IRF5)免疫试剂盒 Mouse ierferon regulatory factor 5,IRF5 ELISA Kit
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。