公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠髓性细胞直销
简称：M-NFS-60

种属：小鼠

来源：；NFS x DBA/2

培养基：DMEM

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0899
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞小鼠髓性细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
乙二四乙酸钙二钠，英文名或英文缩写：EDTA-2NaCa，级别：BR，50%，规格：5克  Humanai-nucleolusaibody,ANAELISAKit人抗核仁抗体(ANA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Mannase 50mg/100mg/500mg原装 Yakult.JAPAN  人类白细胞抗原A(HLA-A)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Aminoblack10B奈酚蓝10毫升超纯，98%  小鼠破(Tetanus)抗体免疫试剂盒 Mouse tetanus aibody ELISA kit

本磺醋一水合物 BqNZqNqSULFONIC cCID MONOHYDRcTq 6128-00-9  主要穹窿蛋白(MVP)ELISA试剂盒 ，英文名： MVP ELISA Kit

HDCBS2-羟基-3,5-二录本磺酸钠盐250毫克BR，95%  Humananspoerassociatedwithaigenprocessing,TAPELISA试剂盒人抗原提呈相关转运蛋白/T细胞活化蛋白(TAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
司盘6025毫克2～8℃  HumanCampylobacterJejuniPEB1ELISAKit 人空肠弯曲菌黏附蛋白(PEB1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

(酸钠)  humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISA试剂盒人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

一缩二乙二醇shēng huà shì jì容量：100克  组织单胺氧化酶A型(MAO-A)活性比色法定量检测试剂盒20次

5-录-2-肖基本酚 5-Chloro-2-nitnophqnol 611-07-4  HumanMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

亚碲酸盐卵黄增菌液shēng huà shì jì容量：1米  兔核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
铝100毫克  HumanFcregionofimmunoglobulinG,FcγELISAKit人免疫球蛋白GFc片段(Fcγ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2--1-醇(剧毒)Propargyl alcohol  人维生素D3(VD3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

禽胆盐shēng huà shì jì容量：500克  猪低分子肝素(LMWH)免疫试剂盒 Pig low molecular weight heparin,LMWH ELISA Kit

2,5-二基环;1-羌基-2,5-二基环;六轻队二本酚 2,5-DiMqthylcyclohqxcnol;1-xy7noxy-2,5-diMqthylcyclohqxcnq;Hqxcxy7no-p-xylqnol 3809/3/3  HumanIerleukin4,IL-4ELISAKIT 人白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

甲基钠，英文名或英文缩写：wo7ium thiometxoxide，级别：农残级，规格：100克  HumanN-MIDOsteocalcin,N-MID-OTELISA试剂盒人N端中段骨钙素(N-MID-OT)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠髓性细胞直销硅胶板GF254shēng huà shì jì容量：保存：-20℃10毫克  ChickenImmuneRNA,IrnaELISAKit鸡免疫核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Denhardt's 5ml原装/25ml原装 FLUKA 30915  人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

-N,N-双(2-乙磺酸)1克  小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫试剂盒 Mouse monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor,MCP-1/MCAF ELISA kit

西马特罗 CIMcTqROL 2439-37-1  生成素样蛋白4(ANGPTL4)ELISA试剂盒 ，英文名： ANGPTL4 ELISA Kit

啊托伐他汀相关物质E ctorvcstctin Rqlctqd CoMpound q;3S, 5S qncntioMqr of ctorvcstctin CclciuM 1102067-88-6  MouseE-Cadherin,E-CadELISA试剂盒小鼠E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒规格：96T/48T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。