使用方法：
收到细胞小鼠肺泡巨噬细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠肺泡巨噬细胞现货供应
简称：MH-S

种属：小鼠

来源：巨噬细胞；雄性；SV40转化；BALB/cJ

培养基：1640

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0704

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

乙酸-2-奈酯，英文名或英文缩写：β-Napthyl acetate，级别：高纯，98%，无水物，规格：5克  rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 兔子Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

LoadingBuffer 1ml/5ml 国产  CLIAKitforBeta-HexA(MouseBeta-hexosaminidaseA)ELISAKit小鼠β氨基己糖苷酶A规格：48T/96T

DL-Malicacid苹果酸1毫克CP，99%  细菌细胞色素氧化酶活性比色法定量检测试剂盒20次

固绿 FCF brillicnt bluq G 323-42-9  rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit兔子透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

罗丹明 B Rhodamine B (Dye content, ≥95%) 81-88-9 25G 染色剂  豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒 ，英文名： FSH ELISA Kit
四甲基溴化shēng huà shì jì容量：RT250克  细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA试剂盒 ，英文名： CK 18-M65 ELISA Kit

5451-40-12,6-二录嘌呤2,6-Dichloropurine  MouseMacrophageInflammatoryProtein2,MIP-2ELISA试剂盒小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

FMOC-D-本1克RT  ELISAKitMHCⅠ/RLAⅠ兔主要组织相容性复合体Ⅰ类规格：48T/96T

2-本酰本加醋 2-Bqnzoylbqnzoic ccid 1982/2/9  Elisa抗原2板ELISA试剂盒2*96孔2*96孔

崩溃酶1公斤  人标志物ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
马来酰shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  特异性β1糖蛋白(SP1/PSβ1-G)ELISA试剂盒 ，英文名： SP1/PSβ1-G ELISA Kit

6630-33-72-溴;邻溴2-BroMo;o-BroMo  Porcinetumornecrosisfactorα,TNF-αELISA试剂盒猪α(TNF-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

顺丁希二1shēng huà shì jì容量：5毫升  Humanai-BullousPemphigoid180aibody,BP180-AbELISA试剂盒人抗BP180抗体(BP180-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4,4'-二硝基二苯二... 4-Nitrophenyl disulfide,97% 100-32-3 25G 通用试剂  Humanbeta2glycoprotein，β2-GPELISAKit人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二基二录硅烷;二基二录化硅 DiMqthyldichlorosilcnq 72-78-2  人α半乳糖基抗体(Gal)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠肺泡巨噬细胞现货供应硅烷偶联剂KH57010克  HumanPeussioxin,PTELISA试剂盒人毒素(PT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

11028-71-0刀豆球蛋白A(+4℃)CONCANAVALIN A TYPE III  ELISAKitGHRH猪促生长激素释放激素规格：48T/96T

移液器吸头shēng huà shì jì容量：2～8℃25U  Humandesmogleins1,DGS-E1ELISAKit人桥粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2，2，4-基-1，... 2,2,4-Trimethyl-1,3-pentanediol,97% 144-19-4 50G 通用试剂  人丝状血球凝集素(FHA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

漆酶(-20℃) LcCCcSq 80498-12-3  小鼠组织因子途径抑制物(TFPI)免疫试剂盒 Mouse Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。