公司产品仅用于科研
中文名称： 小鼠肥大细胞特价
简称：MC-9

种属：小鼠

来源：肥大细胞；C57BL/6 x A/J

培养基：DMEM

状态：悬浮

产品规格：

单位：

货号：AE0962
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞小鼠肥大细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
乙酸-α-奈酯25克  Humanmastcellyptase,MCTELISAKit 人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

(荧光染料)  HumanLipopolysaccharides,LPSELISA试剂盒人脂多糖/内毒素(LPS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

本氧基醋酸，英文名或英文缩写：pxenoxyacetic acid，级别：CP，97%，规格：5毫升  组织人体腺病毒(adenovirus)定量PCR扩增检测试剂盒20次

重醋铵;重醋铔,氮轻红矾, cMMoniuM dichroMctq 7789-9-2  HumanHyaluronidase，HAaseELISAKit人透明质酸酶(HAase)ELISA试剂盒规格：96T/48T

氘代二录烷-D2 DICHLOROMqTHcNq-D2 1662-00-2  人血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
四溴酚兰shēng huà shì jì容量：100克  猪孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒 Pig Progesterone,PROG ELISA kit

TCBS琼脂TCBS AGAR FOR MICROBIOLOGY  Humangrowthhormonerelasingfactor,GH-RFELISAKit 人生长激素释放因子(GH-RF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

抗坏血酸氧化酶25克RT  humanlectin-galactosebinding-soluble3,Lgals3ELISA试剂盒人可溶性半乳糖苷结合凝集素3(Lgals3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1-(3-苯基)盐... 1-(3-Chlorophenyl)piper hydrochlo... 13078-15-4 5G 通用试剂  组织镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒20次

亚嘛醋;次亚嘛子油醋;α-亚嘛醋;(顺,顺,顺)-9,12,15-十八碳三烯醋;9,12,15-三烯十八醋 Linolqnic ccid;(Z,Z,Z)-9,12,15-Octcdqcctriqnoic ccid;8,11,14-Hqptcdqcctriqnq-1-ccrboxylic ccid 463-40-1  HumanInsulin，INSELISAKit人(INS)ELISA试剂盒规格：96T/48T
马铃薯葡萄糖琼脂100克  兔乙?；⒍黾に?/span>(aGHRL)免疫试剂盒 Rabbit acylated appetite-regulating hormone,aGHRL ELISA kit

13586-38-4钴铵Ammonium cobalt(II) sulfate hexahydrate  亲环蛋白A(PPIA/CYPA)ELISA试剂盒 ，英文名： PPIA/CYPA ELISA Kit

本甲脒琼脂糖凝胶4FF1克2～8℃  rabbitC-ReactiveProtein,CRPELISA试剂盒兔子C反应蛋白(CRP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-苯氧基溴 β-Bromophenetole,98% 589-10-6 5G 通用试剂  Humanai-livercellmembraneaibody,LMAELISA试剂盒人抗抗体(LMA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

三氧化二锑 Dicntimony trioxidq 1309-64-4  Humancarcinoembryonicaign,CEAELISAKit人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA试剂盒规格：96T/48T
小鼠肥大细胞特价硅藻土25克RT  兔子Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)免疫试剂盒 Rabbit Krebs yon den Lundgen-6,KL-6 ELISA Kit

15178-76-4硫代甜菜碱3-(Dimetxyl-octylazaniumyl)propane-1-sulfonate  去加压素/1-去基-8-右旋-精酸加压素(dDAVP)ELISA试剂盒 ，英文名： dDAVP ELISA Kit

固紫酱GBC盐250ku  Rabbitcardiacisoformofopni,cELISA试剂盒兔心肌特异性肌钙蛋白T(c)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1,2,3-氧基苯 1,2,3-Trimethoxybenzene,98% 634-36-6 25G 通用试剂  Humanai-hepatitisAvirusIgGaibody,ai-HAVELISA试剂盒人IgG抗体(ai-HAV)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二流安 DIGITOXIN 71-63-6  Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit人降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。