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              上海帛科生物技术有限公司
                 
                 
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              NAD苹果酸酶(NADME)测试盒微量法
              • 品牌:帛科
              • 产地:国产
              • 型号:100管/96样
              • 货号:BK-S01359
              • 发布日期: 2020-10-27
              • 更新日期: 2025-07-11
              产品详请
              产地 国产
              品牌 帛科
              货号 BK-S01359
              用途 公司产品仅用于科研
              英文名称
              包装规格 100管/96样
              纯度 %
              CAS编号
              别名 NAD苹果酸酶(NADME)测试盒
              分子式
              是否进口

              基本信息:

              产品名称

              检测方法

              规格

              货号

              NAD苹果酸酶(NADME)测试盒微量法

              微量法

              100/96

              BK-S01359

              商品介绍:

              测定意义
              ME广泛存在于微生物、培养细胞、动物和植物胞浆中,尤其在植物组织中活性较高。ME催化苹果酸氧化脱羧的可逆反应,产生丙酮酸和CO2,以及伴随NAD(P)+的还原反应,是苹果酸代谢的关键酶。ME活性与生物合成和抗氧化密切相关。近年来植物ME活性测定较多,已经成为抗氧化研究的热点。根据辅酶专一性和对底物特异性的不同,可将ME分为NAD-ME(EC1.1.1.38)NADP-ME(EC1.1.1.40)。

              测定原理:

              NAD-ME催化NAD+还原成NADH,在340nm下测定NADH增加速率。

              需自备的仪器和用品:

              紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

              特点:
              (1)应用广泛 产品仅用于科研
              由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
              (2)灵敏度高
              由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
              (3)选择性好
              目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
              (4)准确度高
              对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
              (5)适用浓度范围广
              可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
              (6)分析成本低、操作简便、快速

              实验方法学:
              一、肝素的配制:
              市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以 更浓一些??梢匀?.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
              肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
              二、血液样本的收集:
              全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
              1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
              2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
              选择抗凝的注意点:
              ①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
              ②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
              ③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
              ④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
              用于测定。
              封闭用正常山羊血清工作液  Ribavirin  36791-04-5  中文名:利巴韦林  分子式:C8H12N4O5  度:98.0%  关键词: 

              吩嗪甲酯   1g  Trenbolone acetate  10161-34-9  中文名:  分子式:C20H24O3  度:98.0%  关键词: 

              分泌型白细胞蛋白酶抑制物 (SLPI)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  Anthraglycoside B  23313-21-5  中文名:大黄素-8-O-葡萄糖苷  分子式:C21H20O10 

              肺表面活性物质相关蛋白A   英文名称:   Pulmonary surfacta associated protein type A   规格:   48T/96T   英文缩写:   SP-A  4-Allyloxy-2-hydroxybenzophenone  中文名:4-丙烯氧基-2-羟基二苯甲酮  分子式:C16H14O3  度:99.0%

              肺表面活性物质相关蛋白 A(SP-A)   作用:   ELISA   规格:   48T/96T   进口分装  Atrazine  1912-24-9  中文名:阿特拉津  分子式:C8H14ClN5
              兔补体蛋白3elisa试剂盒   兔补体蛋白3试剂盒   规格型号:96T/48T   兔补体蛋白3试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔补体蛋白3试剂盒、兔补体蛋白3 elisa试剂盒   保存条件:2-8℃   保质期:6个月。  4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl  114772-54-2  中文名:  分子式:C14H10BrN  度:98.0%  关键词: 

              兔补体蛋白3(C3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile  中文名:  分子式:C7H5ClN2O2  度:98.0%

              兔半胱酸蛋白酶抑制剂elisa试剂盒   兔半胱酸蛋白酶抑制剂试剂盒   规格型号:96T/48T   兔半胱酸蛋白酶抑制剂试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔半胱酸蛋白酶抑制剂试剂盒、兔半胱酸蛋白酶抑制剂elisa试剂盒   保存条件:2-8℃   保质期:6个月。  4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl  114772-54-2  中文名:  分子式:C14H10BrN 

              兔半胱酸蛋白酶抑制剂C   英文名称:   Rabbit Cystatin C   规格:   48T/96T   英文缩写:   CSTC  4-Oxododecanedioic acid  中文名:  分子式:C12H20O5 

              兔半胱酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide  183288-46-2  中文名:  分子式:C13H15N3O2
              5-Formyl-2-furylboronic acid  中文名:  分子式:C5H5BO4  度:98.0%  激酶(PK)测试盒   可见分光光度法   50管/48样           

              1-Methyl-aminomethyl naphthalene  中文名:  分子式:C12H13N  度:98.0%  线粒体呼吸链复合物II试剂盒(琥珀酸-辅酶Q还原酶)

              Terbinafine  中文名:特比萘芬  分子式:C21H25N  度:98.0%  蛋白质羰基含量测定试剂盒(测血清、组织)(紫外比色法)

              N-[3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)phenyl]-6-iodoquinazolin-4-amine  中文名:  分子式:C21H14ClFIN3O  度:98.0%  超微量Ca-ATP酶测定试剂盒

              3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene  中文名:  分子式:C13H9ClFNO3  度:98.0%  超微量Ca2+Mg2+-ATP酶测定试剂盒(比色法)
              NAD苹果酸酶(NADME)测试盒微量法2-Benzylsuccinic acid  3972-36-9  中文名:  分子式:C11H12O4    人抑丝蛋白1(PFN1)酶联吸附测定试剂盒   Human PFN1 (Profilin 1) ELISA Kit              

              3-(tert-Butoxycarbonyl)-2,2-dimethyl-4-phenyloxazolidine-5-carboxylic acid  143527-70-2  中文名:  分子式:C17H23NO5    人中性粒细胞防御素1-3(HNP1-3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

              Atorvastatin calcium  134523-03-8  中文名:阿托伐他汀钙  分子式:C33H35FN2O5    人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

              (2R,3S)-3-Phenylisoserine ethyl ester  143615-00-3  中文名:  分子式:C11H15NO3    人血浆抗凝蛋白S(PS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

              Desloratadine  100643-71-8  中文名:脱羧氯雷他定  分子式:C19H19ClN2    人血浆抗凝蛋白C(PC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
              操作步骤:
              实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
              1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔??瞻卓准友废∈鸵?00μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
              2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
              3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
              4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
              5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
              6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
              7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
              8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

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