细胞的冻存：
1.先将冻存管放入4℃冰箱，约40min。
2.接着置于-20℃冰箱，约30-60min。
3.置于-80超低温冰箱中放置过夜。
4.置于液氮罐中长期保存。
5产品仅用于科研同时做好冻存记录，在自己的笔记本和冻存记录本上均要记录。

产品简称：A375 /DDP
产品名称：人恶性细胞铂耐药株

规格：1×10E6T25/管

种属：Human

货号：CE042

注意事项：
1.使用DMSO前，不需要进行高压灭菌，它本身就有灭菌的作用。高压灭菌反而会破华它的分子结构，以至于降低冷冻?；ばЧ?。在常温下，DMSO对人体有害，故在配制时*戴上手套操作。
2.不宜将冻存细胞放置在0℃～-60℃这一温度范围内过久，低温损伤主要发生在这一温度区内，是“危险温区”。
3.注意定期检查液氮罐内液氮量，及时添加。

具体步骤：
A375 /DDP一. 水的制备：
帛科细胞培养用水必须非常纯净，不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水
二.PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：
1.溶解定容：将药品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有双蒸水的烧杯中，玻璃棒搅动，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml，摇匀即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶内待消毒：将PBS倒入溶液瓶（大的吊针瓶）内，盖上胶帽，并插上针头放入高压锅内8磅消毒20分钟。注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制与消毒：
胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH为8.0、温度为37℃时，胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。
1.称取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液浓度为0.25％，用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水（若用双蒸水需要调PH到7.2左右）或PBS（D-hanks）液中。搅拌混匀，置于4℃内过夜。
2.用注射滤器抽滤消毒：配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器（0.22微米微孔滤膜）抽滤除菌。然后分装成小瓶于-20℃保存以备使用。

细胞计数：
1.盖好盖玻片：取一套血球计数板，将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。
2.制备计数用的细胞悬液：用吸管吸5滴细胞悬液到一离心管中，加入5滴台盼蓝染液（0.4％）或苯胺黑，活细胞不会被染色，加入染液后就可以在显微镜下区别活细胞和死细胞。
3.将细胞悬液滴入计数板：将待测细胞悬液吹均匀，然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入，要保证盖片下充满悬液，注意盖片下不要有气泡，也不能让悬液流入旁边槽中。
4.统计四个大格的细胞数：将血球计数板放于显微镜的低倍镜下观察，并移动计数板，当看到镜中出现计数方格后，数出四角的四个大铬（每个大格含有16个中铬）中没有被染液染上色的细胞数目。
5.计算原细胞悬液的细胞数:按照下面公式计算细胞密度：
（细胞悬液的细胞数）/ml＝ （ 四个大格子细胞数/4) ×2×104
说明：公式中除以4因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以2因为细胞悬液于染液是1：1稀释。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为：
1.0mm（长）×1.0mm（宽）×0.1mm（高）＝0.1mm3 而 1ml＝1000mm3

重组人甲状旁腺激素1-84，英文名或英文缩写：PTH1-84，级别：BR，98%，规格：1克  Ratai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISA试剂盒大鼠抗心1脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1562-00-1磺酸钠wo7ium isate  Humanchaperonin10,CPN10ELISA试剂盒人伴侣蛋白10(CPN10)ELISA试剂盒规格：96T/48T

potewwiumIODIDE化钾ACS级白色小球RTsigma  humanEchoVirusIgM，ECHOIgMELISAKit人艾柯病毒IgM(ECHOIgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

环戊甲醛 Cyclopentanecarboxaldehyde,97% 872-53-7 1G 通用试剂  牛血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

亚铈/八水合亚铈/Cerium(III) sulfate octahydrate CP，97% 25克 国产/进口  人组织多肽抗原(TPA)免疫试剂盒 Human Tissue Polypeptide Aigen,TPA ELISA Kit
盐酸吡哆醛2KU  Humanai-lymphocyteglobulin,ALGELISAKit人抗淋巴细胞球蛋白(ALG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(蛋白A)  人可溶性相关凋亡诱导配体(sAIL)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(9S)-6'-甲氧基辛可宁-9-醇，英文名或英文缩写：Cinchonidine，级别：CP，规格：25克  小鼠凝血因子Ⅶ(FⅦ)免疫试剂盒 Mouse coagulation factor Ⅶ,FⅦ ELISA Kit

5-基吡嗪-2-羧醋 5-Mqthyl-2-pyrczinqccrboxylic ccid 221-22-1  特异性抗原(TSA)ELISA试剂盒 ，英文名： TSA ELISA Kit

中性蛋白酶shēng huà shì jì容量：1公斤  Humaubularbasememembraneaibogy,TBMELISA试剂盒人抗肾小管基底膜抗体(TBM)ELISA试剂盒规格：96T/48T
碳酸镍，英文名或英文缩写：Nickel(II) caonate basic tetrahydrate，级别：AR，99%，规格：5克  神经型合成酶(nNOS)ELISA试剂盒 ，英文名： nNOS ELISA Kit

甲硫醚络合物Borane-metxyl sulfide coMplex AcroSeal  PorcineHydrocoisone,HYDELISA试剂盒猪(HYD)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-酸钠均聚物，英文名或英文缩写：PAAS，级别：IPC，98%，规格：5克  HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISA试剂盒人?；碳さ鞍?/span>(ASP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

诃子鞣酸 Chebulagic acid (HPLC,≥98%) 23094-71-5 5MG 标准品  Humanai-Sa-aibodyELISAKit人抗Sa抗体(ai-Sa-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

DL-苏安醋;DL-α-安基-β-羌基丁醋;DL-羌基丁安醋;DL-异赤丝藻安基醋 DL-Thrqoninq;DL-2-cMino-3-xy7noxybutcnoic ccid 80-68-  人白介素13(IL-13)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
A375 /DDP粒shēng huà shì jì容量：RT25克  小鼠ⅡD组1脂酶A2(PLA2G2D)ELISA试剂盒 ，英文名： PLA2G2D ELISA Kit

potewwiumChloride 100g/250g/500g/1kg Amresco 0395  人促黄体激素(LH)ELISA检测试剂盒Humanleoopichormone,LHELISAKit 96T/48T

生根粉100克  大鼠泛素蛋白(Ub)免疫试剂盒 Rat Ubiquitin,Ub ELISA Kit

6-溴吲哚 6-Bromo-1H-indolq 2412/9/9  CLIAKitforUb(MouseUbiquitin)ELISAKit小鼠泛素蛋白规格：48T/96T

β-蛋白组学级250MLRT  柠檬酸化学法冰冻切片抗原修复处理试剂盒20/50次
帛科细胞工厂适用于工业批量 ，如疫苗，单克隆抗体或者制药工业，也适用于实验室操作和大规模细胞培养。方便实用，有效避免污染。