产品参数：
产品仅供科研使用产品名称：芹菜源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

PCR实验方法步骤：
芹菜源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
大鼠细胞;Y3-Ag 1.2.32,7-二溴芴(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)2,7-Dibromofluorene

QG-56细胞，肺扁平上皮癌细胞 人口腔上皮癌长春新碱耐药株,KB/V细胞 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C22,7-二溴-9-芴酮(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)2,7-Dibromo-9-fluorenone

小鼠腹水瘤细胞;S-1802,7-二溴萘(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)2,7-Dibromonaphthalene

IFNGR1 Others Human 人 IFN-gamma R1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,7-二溴-9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)2,7-Dibromo-9,9'-spirobi[9H-fluorene]

人小脑颗粒细胞裂解物HCGCL2,6-二甲基-3,5-庚二酮(>97.0%(GC))质量规格：>97.0%(GC)2,6-Dimethyl-3,5-heptanedione
PDGFRB Others Human 人 PDGFRB / PDGFR-1 / CD140b 人细胞裂解液 (阳性对照) L-半胱氨酸(标准品)质量规格：>98%,标准品L-Cysteine

人肺微内皮细胞总RNAHPMEC NAL-半胱氨酸盐酸盐，一水质量规格：>99%,BRL-Cysteine hydrochloride monohydrate

HCC1937细胞，人癌细胞 鼠胸腺激酶缺陷细胞株,L-MTK细胞 原代细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装：500/100mlDL-半胱氨酸质量规格：>97%,易氧化DL-Cysteine

M-NFS-60 (小鼠细胞G-CSF依赖性) 5×106cells/瓶×2L-谷氨酰胺叔丁酯盐酸盐质量规格：0.98L-Glutamine t-butyl ester hydrochloride

HDBEC adult Pellet 人皮肤内皮细胞团块(成年捐献者) > 1 mio.cells 间充质干细胞软骨细胞分化培养基MCDM-prfL-谷氨酸-5-叔丁酯-1-甲酯盐酸盐质量规格：>95%,BRL-Glutamic acid 5-tert-butyl 1-methyl ester hydrochloride
EFNA5 Protein Human 重组人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (His 标签)L(+)-2-基-5-脲戊酸，英文名或英文缩写：L-Citrulline，级别：BR，99%，规格：25克

HCC94(人子宫鳞癌细胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2 肝动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)1,2-二基本;邻二基本 1,2-Diqthylbqnzqnq 132-01-3

HUM, 正常人主动脉平滑肌细胞桑色速;摩林;皇;2′,3,4′,5,7-五羌基皇同 Morin;Tqtrcxy7noxyflcvcnol;2′-xy7noxypqlcrgidqnolon;Ncturcl yqllow 8;Ncturcl yqllow 11;C.I. 75660 624022-01-3

SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人细胞裂解液 (阳性对照) 媒染蓝B，英文名或英文缩写：Acid alizarin blue B，级别：ACS级，规格：1克

人正常肺上皮细胞;BEAS-2B1114-34-7D-来苏糖D-LYXOSE
芹菜源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 人细胞裂解液 (阳性对照) 5,5-二甲基-1,3-环己二酮5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedione质量规格：BR

JeKo-1 人套细胞瘤细胞5-氟胞苷(>98%,BR)5-Fluorocytidine质量规格：>98%,BR

22RV1人细胞 Human prostate cancer 22RV1 cells 人4-甲基伞形酮-β-D-木糖苷4-Methylumbelliferyl-β-D-xylopyranoside Printable Reviews质量规格：0.99

其他细胞因子2-脱氧-D-核糖2-Deoxy-D-Ribose质量规格：>98%,BR

小鼠海马趾神经细胞(MH-h)(1×106) HCT116, 人结细胞 HumanD-半乳糖(标准品)D-Galactose质量规格：HPLC≥98%，标准品