产品参数：
产品仅供科研使用产品名称：性大肠埃希氏菌五重探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

PCR实验方法步骤：
性大肠埃希氏菌五重探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;MuM-2B血清兔抗BSA10克RT

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 酰辅酶A 内盐 ≥93% (HPLC) (-20℃) ccqtyl coqnzymq c wo7ium sclt 1009-73-

MDA-MB-436 人腺癌细胞葡聚糖凝胶 Sephade... Sephadex G-50 Fine 9048-71-9 100G 分离试剂

NCI-H358人非小细胞细胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSwo7iumGluconate葡萄糖酸钠*白色至微黄色精细结晶RTsigma

KITLG Protein Human 重组人 SCF / C-kit ligand 蛋白 (aa 1-189, His 标签)(甘油)
RS1(大鼠皮肤成纤维样细胞) 5×106cells/瓶×2 THP-1(人单核细胞)梓醇（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Catalpol

CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形细胞)5×106cells/瓶×2紫草素,左旋紫草素(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Shikonin

RK1 Others Rat 大鼠 kA / RK1 人细胞裂解液 (阳性对照) 紫草酸（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Lithospermic acid

人内皮细胞裂解物HLECL紫丁香酚苷（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Syringin

A2780/Taxol细胞，人紫杉醇耐药株 鼠腹水单核细胞瘤,J774A.1细胞 组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)/1ml竹节参皂苷IVa（标准品）质量规格：供含量测定用chikusetsu saponin Iva
rRTEC, 大鼠肾小管上皮细胞录化亚锑，英文名或英文缩写：Antimony(III)chloride，级别：CP，规格：10克

ENPP2 Others Human 人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人细胞裂解液 (阳性对照) 氧化钨铵 Ammonium metatungstate hydrate,≥99.0% 174501-64-5 25G 通用试剂

大鼠嗅鞘细胞完全培养基 100mL1醋 ≥99%(2-8℃) LIGNOCqRIC cCID 227-29-2

DH82狗肾恶性症细胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS曙红Y(水溶)shēng huà shì jì容量：100克

IFNA5 Protein Human 重组人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 标签)9025-35-8α-半乳糖苷酶(+4℃)EC 3.2.1.22
性大肠埃希氏菌五重探针法荧光定量PCR试剂盒P3X63Ag8.653细胞，细胞 耐长春新碱细胞系,HCT-8/VCR细胞 CM-H028人内皮细胞完全培养基100mLN-Boc-N-去甲伊马替尼N-Boc-N-Desmethyl Imatinib质量规格：美国进口

正常大鼠肾细胞;NRK伊立替康标记物d10Irinotecan Labeled d10质量规格：美国进口

REG3A Others Mouse 小鼠 REG3A 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-O-甲基-d3-鸟嘌呤6-O-Methyl-d3-guanine质量规格：美国进口

口腔角质细胞培养基OKMN7-(2-氨基甲酰-2-羟乙基)鸟嘌呤N7-(2-Carbamoyl-2-hydroxyethyl)guanine质量规格：美国进口

MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2-氨基-6,8-二羟基嘌呤盐酸盐2-Amino-6,8-dihydroxypurine Hydrochloride质量规格：美国进口