PCR实验方法步骤：
RT-猪病毒型探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：RT-猪病毒型探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Suid Herpesvirus-1(SuHV-1) I
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
SF9, 昆虫卵巢细胞 其它叠氮-赤-鞘氨醇质量规格：美国进口Azido-erythro-sphingosine

CD19 Others Mouse 小鼠 CD19 / Leu-12 人细胞裂解液 (阳性对照) DL-赤-二氢鞘氨醇质量规格：美国进口DL-erythro-Dihydrosphingosine

人滋养层绒毛细胞裂解物HVTLD-赤-二氢-D-鞘氨醇-1-1酸盐质量规格：美国进口D-erythro-Dihydro-D-sphingosine-1-phosphate

IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液 (阳性对照) 笼形D-赤-鞘氨醇-1-1酸盐质量规格：美国进口Caged D-erythro-Sphingosine-1-phosphate

BALB/C小鼠肝上皮细胞;BNL 1ME A.7R.1L-(-)-葡萄糖(标准品)质量规格：>98%,标准品L-(-)-Glucose
非洲绿猴肾细胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2 人癌细胞，MCF-7细胞 SPC-A-1()地美司钠质量规格：美国进口Dimesna

人卵巢;PA-1甲磺酸多拉司琼质量规格：>98.5%,BRDolasetron mesylate

ICAM2 Others Human 人 CD102 / ICAM2 人细胞裂解液 (阳性对照) 地拉罗司,去铁斯若质量规格：>99.0%Deferasirox

CM-H069人膀胱平滑肌细胞完全培养基100mL地拉罗司(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品Deferasirox

CPLX3 Others Human 人 CPLX3 / Complexin 3 人细胞裂解液 (阳性对照) 利培酮质量规格：>98%,BR,可用于细胞培养Risperidone
成纤维细胞培养基FM-sfTIBA2,3,5-三代本酸5克CP，99%

IL6ST Others Cynomolgus 食蟹猴 IL6ST / gp130 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-(4-叔丁基苯)-5-(... 2-(4-tert-Butylphenyl)-5-(4-biphenylyl... 15082-28-7 5G 通用试剂

人类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN务二晴punum>98% Glutcronitnilq 244-13-8

F2-2细胞，5-8转基因细胞系 小鼠色素瘤细胞,B16BL6细胞 CM-H047人肝窦内皮细胞完全培养基100mLTOTALPROTEINCELLLYSISBUFFER总蛋白细胞裂解缓冲液蛋白组学级透明无色液体COLDsigma

NRK-52E(大鼠肾小管导管上皮细胞) 5×106cells/瓶×21343-88-0硅酸载体 silicate
RT-猪病毒型探针法荧光定量PCR试剂盒幼蚊细胞;C6/36 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤，PC-12细胞 HeLa 229(细胞)L-异亮氨酸叔丁酯盐酸盐L-Isoleucine t-butyl ester hydrochloride质量规格：>98%,BR

人上皮细胞;Hep-2L-谷氨酰胺(标准品)L-Glutamine 质量规格：HPLC≥98%，标准品

PRMT6 Others Human 人 PRMT6 / HRMT1L6 人细胞裂解液 (阳性对照) 谷胱甘肽（还原型）Glutathione (Reduced);GSH质量规格：>98%,BR

犬肾细胞;MDCK(NBL-2)L-谷胱甘肽（标准品）Glutathione (Reduced)质量规格：HPLC>98%,标准品,还原型

F3 Others Human 人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人细胞裂解液 (阳性对照) 谷胱甘肽（氧化型）Glutathione(Oxidized)质量规格：度大于98%,BR

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。