PCR实验方法步骤：
斑石鲷虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：斑石鲷虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Spotted Knifejaw Iridovirus(SKIV)
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人正常上皮细胞;MCF 10AAmresco 进分琼脂粉质量规格：BR,进分Agar

人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC) ( 5×105 )氟伏沙明质量规格：>98%,油状Fluvoxamine

CL-0325C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纤维细胞)5×106cells/瓶×2醋酸锌（二水）质量规格：AR,>98%Zinc acetate

人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;M619 大鼠胎儿真皮成纤维细胞完全培养基 100mL舒巴坦钠质量规格：BR,>99%Sulbactam

H-4-II-E 大鼠肝细胞瘤细胞9-溴芴(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)9-Bromofluorene
人表皮微内皮细胞(HDMEC)( 5×105 ) 人少突胶质细胞 Human雷氏曼着色剂质量规格：BSLeishman's stain

CM-H033人肠微内皮细胞完全培养基100mL来普霉素B 1%溶液质量规格：>95%(HPLC),BCLeptomycin B 1% soluton

DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸氟氢可的(标准品)质量规格：含量97%-103%,标准品Fludrocortisone acetate

人平滑肌细胞HBVSMC醋酸氟氢可的质量规格：>97%Fludrocortisone acetate

HEL细胞，人红白细胞细胞 小鼠肾集合管细胞(SV40转化),M-1细胞 成纤维细胞培养基FM-acf阿折地平质量规格：>99%,BRAzelnidipine
大鼠骨骼肌成肌细胞;L6UREA尿素超级白色粉末RTsigma

HA Others H7N9 甲型 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 十五烷酸 Pentadecanoic acid,99% 1002-84-2 10G 通用试剂

T-103AI型胶原酶(含10mL酶解缓冲液)1mLHE琼脂 HqKTOqN qNTqRIC cGcR FOR

TU 686细胞，人细胞 人脐内皮细胞,ECV-304细胞 中国仓鼠卵巢细胞-二氢叶酸还原酶缺陷型;CHO/dhFr-CALCIUMCHLORIDE,ANxy7noUS录化钙,无水ACS级白色精细片状粉末RTsigma

C-33 A(人子细胞) 5×106cells/瓶×21079-66-9二本基录化膦Chlorodipxenylphosphine
斑石鲷虹彩病毒探针法荧光定量PCR试剂盒3T3细胞，小鼠成纤维细胞 COLO 205(细胞) 人肾透明细胞癌;Caki-1(1S,4S)-N-去甲基盐酸舍曲林(1S,4S)-N-Desmethyl Sertraline Hydrochloride质量规格：美国进口

CSF2 Protein Mouse 重组小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 标签)N-去甲基利福平N-Demethyl Rifampin质量规格：美国进口

T-47D(人管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 去甲基波生坦Desmethyl Bosentan质量规格：美国进口

人表皮色素细胞-浅色素HEM-l羟基去甲基波生坦Hydroxy Desmethyl Bosentan质量规格：美国进口

CD22 Others Human 人 Siglec-2 / CD22 人细胞裂解液 (阳性对照) 波生坦Bosentan质量规格：美国进口

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。