PCR实验方法步骤：
马红球菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：马红球菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Rhodococcus equi
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人整合SV40基因的上皮细胞;HBL-100 [HBL100] 人肾动脉平滑肌细胞完全培养基 100mLD-泛醇shēng huà shì jì容量：2～8℃5克

人脐带间充质干细胞RNAHUMSC miRNA5 μg1-芘丁醇 99% 1-PYRqNqBUTcNOL 67000-89-9

CDH2 Others Mouse 小鼠 N-Cadherin / CD325 / CDH2 人细胞裂解液 (阳性对照) 癸烷磺酸钠shēng huà shì jì容量：RT5克

恒河猴肾细胞;LLC-MK2CAPRYLICACID辛酸超级透明，白色至浅黄色液体RTsigma

RKO-E6细胞，人转基因细胞 人侵袭性脉络膜色素瘤细胞,M619细胞 人耐VP16绒癌细胞株;JEG-3/VP16540-63-61,2-乙二;二流代以儿醇;1,2-二;1,2-二1, 2-Ethanedithiol;Ditxioglyol;1,2-DiMercaptoethane;Dithioetxyleneglycol;etxylene Mercaptan;etxylone diMercaptan
CBRH-7919 大鼠细胞EDTADIwo7iumSALTDIHYDRATE乙二安四乙酸二钠,二水生物技术级白色结晶粉末RTsigma

CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人细胞裂解液 (阳性对照) 复达欣 Ceftazidime hydrate,90.0-105.0% 120618-65-7 500MG 通用试剂

大鼠肝细胞;BRL 3A海安1622 HycMinq 1622;Quctrcchlor;PhqMqrol chloridq;PhqMqridq;PhqMithyn;BqnzqthoniuM chloridq Monohydrctq;BqnzyldiMqthyl {2-[2-(p-1,1,3,3-tqtrcMqthylbutylphqnoxy)qthoxy]qthyl}cMMoniuM chloridq;Diisobutylphq-noxyqthoxyqthyldiMqthylbqnzylcMMoniuM chloridq Monohydr 11-24-0

IFNG Others Mouse 小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 人细胞裂解液 (阳性对照) DTT(DL-DITHIOTHREITOL)二硫苏糖醇生物技术级白色粉末FROZENsigma

L1210瘤 106-50-31,4-本;对本;1,4-二基本;乌尔丝D1,4-pxenylenediaMine;p-pxenylenediaMine;1,4- DiaMinobenzene;1,4-BenzenediaMine;Ursol D
人胚胎绒毛细胞(HAF)(1×106 )无水氯化钙(>96%,Tech Grade)Calcium chloride, anhydrous质量规格：>96%,Tech Grade

CM-R112大鼠小脑颗粒细胞完全培养基100mL草酸钙一水(>98%，BR)Calcium oxalate, monohydrate质量规格：>98%，BR

小鼠癌细胞;CCC-Ca761-03 小鼠外周血白细胞完全培养基 100mL氧化钙(>98%，BR)Calcium oxide (Lime) powder质量规格：>98%，BR

人少突胶质细胞 Human氧化钙(块)(>98%，BR)Calcium oxide lump质量规格：>98%，BR

NCR2 Others Human 人 NKp44 / NCR2 / CD336 人细胞裂解液 (阳性对照) 1酸二氢钙一水(85%~95%,BR)Calcium phosphate, monobasic, monohydrate质量规格：85%~95%,BR
马红球菌探针法荧光定量PCR试剂盒TNFRSF19 Others Human 人 TNFRSF19 / OY 人细胞裂解液 (阳性对照) Boc-O-叔丁基-L-酪氨酸Boc-O-tert-butyl-L-tyrosine质量规格：>98%,BR

狗脂肪间质干细胞 The dog adipose mesenchymal stem cellsNVP-BKM120BKM120;NVPBKM120; Buparlisib)质量规格：>98%,选择性的PI3K抑制剂

HOPC-os细胞，人少突胶质前体细胞 构巢曲霉 人胚肾细胞;293 [HEK-293]NHS-biotin;生物素琥珀酯 NHS-biotin 质量规格：>98%,BR

SW 1353(人细胞) 5×106cells/瓶×2雷贝拉唑钠(标准品)Rebeprazole 质量规格：HPLC≥98%,标准品

HFL1(人) 5×106cells/瓶×2 CL-0466WI38/VA13(SV-40Z转化)5×106cells/瓶×2 人张氏肝细胞;Chang liver雷贝拉唑钠Rebeprazole 质量规格：≥98%,BR

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。