PCR实验方法步骤：
鲑肾杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：鲑肾杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Renibacterium salmoninarum
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
RSC, 大鼠雪旺细胞偶氮脒类引发剂V65100毫克保存：-20℃

转化细胞 人卵巢成纤维细胞完全培养基 100mL2,3-务二同 97% 2,3-Pqntcnqdionq 600-14-6

人脉络丛成纤维细胞RNAHCPF miRNA5 μg碳酸10克

KYNU Others Human 人 KYNU / Kynureninase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 小鼠血清(无菌)100克RT

犬肾细胞;MDCK(NBL-2)2-脱氧鸟苷-5-三1酸钠盐(+4℃)NA
细胞名称 种属二水合录化钙，英文名或英文缩写：Calcium chloride dihydrate，级别：AR，99.5%，规格：250毫克

CD83 Others Human 人 CD83 / HB15 人细胞裂解液 (阳性对照) 羧化辅酶 ≥97%(-20℃) Coccrboxylcsq 124-87-0

大鼠肝细胞瘤;H-4-II-EUREA,8MSOLUTION尿素蛋白组学级透明无色液体COLDsigma

人主动脉内皮细胞 (HAEC)( 5×105 )2-乙基丁醇，英文名或英文缩写：2-etxyl-1-butanol，级别：高，99%，规格：25克

CL-0019AAV-293(人胚肾细胞)5×106cells/瓶×2Ammoniumsulfate 250g/500g/1kg/5kg Amresco 0191
PAH Others Human 人 PAH / PH (415 Asn/Asp) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 十二烷基硫酸锂Lithium Dodecyl Sulfate质量规格：>98%,分子生物学级

CM-R094大鼠胎儿表皮角质形成层细胞完全培养基100mL硫代甜菜碱 8Sulfobetaine 8质量规格：>98%,sigma分装

HEC-1A, 人细胞系 肝细胞,BRL细胞 TE 115.T(人软组织细胞)硫代甜菜碱 10Sulfobetaine 10质量规格：>98%,BR

小鼠细胞;L1210硫代甜菜碱 12Sulfobetaine 12,SDDAB质量规格：>98%,BR

EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人细胞裂解液 (阳性对照) 恩他卡朋;COMT抑制剂Entacapone质量规格：>99%,BR
鲑肾杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 锌试剂Zincon质量规格：螯合剂

F344大鼠骨髓间质干细胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cellsN-甲基-N-*硅基乙酰胺(>92.0%(GC))N-Methyl-N-TMS-acetamide质量规格：>92.0%(GC)

U373细胞，人脑细胞系 福氏志贺氏菌(Shigella flexneri) 人无色素睫状上皮细胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μgN-*基硅基咪唑(>98.0%(T))N-Trimethylsilylimidazole质量规格：>98.0%(T)

SK-N-BE(2) (人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2N-*基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))N-Trimethylsilylacetamide质量规格：>98.0%(GC)

HEC-1-B(人子宫内膜腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人细胞)5×106cells/瓶×2 散鳞镜鲤尾鳍细胞;YZ211,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))1,1,3,3-Tetramethyldisilazane质量规格：>97.0%(GC)

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。