PCR实验方法步骤：
普雷沃菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：普雷沃菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Prevotella spp.
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
CCL18 Protein Human 重组人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 标签)偏钒酸钠shēng huà shì jì容量：0.25毫升

MCF-7(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,5-二溴 2,5-Dibromopyridinq 64-8-

猫肾细胞;CRFK正shēng huà shì jì容量：100克

人颅骨造骨细胞 (HCO) ( 5×105 )马丁肉汤shēng huà shì jì容量：RT支

CL-0099HEC-1-A(人子宫内膜腺癌细胞)5×106cells/瓶×278-79-5, 99%Isoprene
KYSE450 橘霉素，英文名或英文缩写：Citrinin，级别：组织培养级，10KU/ml，规格：500毫克

RL95-2人细胞 Human endomeial carcinoma cells RL95-2 D-MEM/F-12培养基+10%FBS十六烷基二基基溴化铵 (EHDAB) CqTYLDIMqTHYLqTHYLcMMONIUM BROMIDq 2014/3/8

HGF Protein Mouse 重组小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 标签)SULFATEHEPTAHYDRATE,七水ACS级白色粉末RTsigma

小小神经胶质细胞(MM)(5×105) RBE, 人肝细胞 Human葡糖酸钾盐，英文名或英文缩写：potewwium gluconate，级别：土豆来源，规格：1克

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化);PC-12(低分化)4-Chloro-1-Naphthol 5g/10g/25g/50g原装 Amresco 0398
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 酞菁铜(II)(β-型)(>90.0%(T))Copper(II) Phthalocyanine (β-form)质量规格：>90.0%(T)

小鼠子细胞;U14三(1,3-二苯基-1,3-丙二酮基)(1,10-邻二氮杂菲)铕(Ⅲ)(>95.0%(T))Tris(1,3-diphenyl-1,3-propanedionato)(1,10-phenanthroline)europium(III)质量规格：>95.0%(T)

METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 3-(2-苯并噻唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(HPLC)(T))3-(2-Benzothiazolyl)-7-(diethylamino)coumarin质量规格：>98.0%(HPLC)(T)

CM-M001小鼠肺微内皮细胞完全培养基100mL 3-(2-苯并咪唑基)-7-(二乙氨基)(>98.0%(T))3-(2-Benzimidazolyl)-7-(diethylamino)coumarin质量规格：>98.0%(T)

Hela, 人细胞系 小鼠成纤维细胞,3T3TK细胞 SPA-A1()4,4'-双(5-甲基-2-苯并恶唑基)芪(升华提)(>96.0%(HPLC))4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene (purified by sublimation)质量规格：>96.0%(HPLC)
普雷沃菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒JEG-3(人细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 IL-21R / Ierleukin-21 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 轮环藤宁四乙酸/1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid质量规格：>95%

人成细胞;Saos-2p, p’-DDE(标准品)p, p’-DDE质量规格：分析标准品

PPP3CA Others Human 人 PPP3CA / 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) p, p’-DDE标准溶液(100μg/ml,u=3%)p, p’-DDE solution质量规格：100μg/ml,u=3%

CL-0429Romas(人瘤细胞)5×106cells/瓶×2敌草腈(标准品)Dichlobenil质量规格：分析标准品

人绒毛膜内皮细胞 人胚胎皮肤成纤维细胞，CCC-ESF-1细胞 Sol8(小鼠骨骼肌肌肉母细胞)乙二醇苯(标准品)Ethylene glycol monophenyl ether质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。