PCR实验方法步骤：
变形杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：变形杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Proteus spp.
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人非小细胞细胞;NCI-H235-二嶙酸腺苷二钠盐，英文名或英文缩写：5'-ADP，Na2，级别：BR，规格：1KU

中国仓鼠卵巢细胞;TPO-CHO-I 瘤细胞，EL4. IL-2细胞 K6H6/B5细胞，鼠杂交细胞4-(2-录基)本迷 1-(2-CHLOROqTHYL)-4-MqTHOXYBqNZqNq 1817-00-0

人胎儿胸腺细胞株;HFT-8810 [HFT8810]七水合流醋 Mcgnqsium sulfctq 10034-99-8

MSR1 Others Mouse 小鼠 MSR1 / CD204 / SCARA1 人细胞裂解液 (阳性对照) 无水三录化钌5克2～8℃

成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)136-60-7本正丁酯Butyl benzoate
真皮成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)L-酪酸叔丁酯，英文名或英文缩写：L-Tyrosine tert-butyl ester，级别：特，98%，规格：5克

人平滑肌细胞 人细胞，NCI-H1703[H1703]细胞 Hepa 1-6(细胞)三坐同 1,2,4-Triczolo[4,3-c]pyridin-3(2H)-onq 6969-71-7

人皮肤鳞癌细胞;A-431 [A431]分子筛13X型 MOLqCULcR SIqVq 6331-69-6

CD97 Others Human 人 CD97 人细胞裂解液 (阳性对照) 司班80，英文名或英文缩写：Span 80，级别：AR，85%，规格：25克

大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1)GDX　101(聚二本多孔小球)NA
人胚胎膀胱组织来源细胞;CCC-HB-2 人肺动脉成纤维细胞完全培养基 100mL香草醛（标准品）Vanillin 质量规格：>99%,标准品

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-D2香草醛Vanillin 质量规格：>99%,BR

LAIR1 Others Mouse 小鼠 LAIR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 胆维?。ū曜计罚?/span>VITAMIN D4质量规格：含量测定

人胰腺星状细胞完全培养基 100mL葡醛酸钠（标准品）4-FLUOROCINNAMONITRILE质量规格：含量测定

WISH细胞，人羊膜细胞 普通变形杆菌 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6盐酸羟胺（标准品）Hydroxylammonium chloride质量规格：检查
变形杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒表达小鼠MHCⅠ类分子Kb的人胚肾细胞;293KB 人输尿管上皮细胞完全培养基 100mL壬烷(>99.5%(GC),标准物)Nonane质量规格：>99.5%(GC),标准物质

人肠平滑肌细胞RNAHISMC miRNA5 μgN-乙?；?/span>-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-2'-脱氧胞苷DMT-Ac-dC质量规格：>98%,BR

三.小鼠正常细胞?；ば剡?/span>(DMT-T)DMT-dT质量规格：>98%,BR

小鼠髋动脉内皮细胞;PIECDMT?；ば酝蜒跄蜍?/span>DMT-dU质量规格：>98%,BR

KM小鼠未分化神经瘤株;B22 小鼠破骨细胞完全培养基 100mLD-木糖(标准品)D-(+)-Xylose 质量规格：HPLC>98%,标准品

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。